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化学感受态细胞该菌株衍生自大肠杆菌菌株B，具有lon和ompT蛋白酶缺陷的优点，是目前应用广泛的表达宿主菌之一，其操作方法如下：1、化学感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，6分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手滑动EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。2、42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置5分钟，晃动会降低转化效率。3、向离心管中加入0.9mL室温S.O.C.(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)或LB培养基。4、30℃，250rpm复苏60分钟。当
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药物是不能乱吃的，需要在医生的指导下服用！重组人干扰素α2b又叫长生扶康，是一种微黄色或白色疏松体，溶解后为澄明液体，无肉眼可见的不溶物。重组人干扰素α2b通过肌肉或皮下注射，血液浓度达峰时间为3.5～8小时，消除半衰期为4～12小时。肾脏分解代谢为干扰素主要消除途径，而胆汁分泌与肝脏代谢的消除是重要途径。肌内注射或皮下注射的吸收超过80%。重组人干扰素α2b用法用量1.慢性乙型肝炎：皮下或肌内注射，3～6×106IU/日，连用四周后改为3次/周，连用16周以上。2.慢性粒细胞白血病：3～5×1
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哺乳动物细胞真核表达系统在表达过程中有翻译后修饰和折叠的功能，这一特点使其蛋白更接近天然蛋白，具备天然蛋白必须的空间结构和修饰，与天然蛋白有相同的生物活性，哺乳动物细胞表达系统在功能蛋白、抗体生产、临床疫苗的研发和生产中应用较为广泛。原核表达系统具有表达水平高、操作简单、周期短、易于大规模高密度培养、成本低等优点，而对于全抗体和糖蛋白类生物药物来说，表达产物多肽链的折叠、二硫键的形成、糖基化的有无以及糖基化的类型常常影响表达产物的合成分泌、生物活性、体内稳定性以及免疫原性等特性。由于原核细胞缺少
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重组蛋白作为生物制药在医学中作用显著，一般用转基因动物的乳腺产生。重组蛋白真核表达包括酵母表达系统、杆状病毒-昆虫细胞表达系统、腺病毒表达系统等。一般可以正确折叠，包含各种修改。但是价格高，周期长。重组蛋白真核表达系统技术平台的特色快速、highly-stringent筛选：只筛选到高表达稳定株；4～5个月获得稳定高表达细胞株（常规方法要9～12个月）高效表达：*启动子和*分泌信号肽，很容易达到30p/c/d/以上（传统方法需要用药物筛选9～11轮以上才能达到）稳定表达：表达质粒上的AGE稳定子
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支原体是一种特殊的微生物，在哺乳动物（包括人类）、爬行动物、昆虫和植物中广泛分布。它是小、较为简单的可自我复制的原核生物，大小仅为0.2-0.8um。支原体的基因组仅为0.58-2.20Mb，其自身生物合成能力有限，因此大部分营养物质都要依赖于宿主。在真核细胞培养过程中，支原体感染发生率达到63%，因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。细胞培养中常遇见的有细菌污染、真菌污染、支原体污染、病毒污染等。说起支原体污染，估计细胞培养的同学就开始犯愁了，细胞培养的老手都知道，支原体污染非常不
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化学感受态细胞是常规克隆和亚克隆实验应用较为合适的解决方案。经氯化钙处理，促进质粒DNA黏附于感受态细胞膜上。将感受态细胞通过水浴热激，使细胞膜孔打开，从而质粒可以进入。操作方法：（以下操作均按无菌条件的标准进行）1、取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中，置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100μl感受态细胞为例。2、向感受态细胞悬液中加入
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多克隆抗体就是用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物，刺激机体多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体后，所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物。由一种抗原决定簇刺激机体，由一个B淋巴细胞接受该抗原刺激所产生的抗体称之为单克隆抗体。由多种抗原决定簇刺激机体，相应地就产生各种各样的单克隆抗体，这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体。多克隆抗体与单克隆抗体的应用比较（1）多克隆抗体的应用一种良好的多克隆抗血清含有抗某种抗原不同表位的多种抗体。由于多克隆抗血清通常包含抗某一抗原的不同表位的抗
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M15化学感受态细胞是采用大肠杆菌M15菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。它能表达lac阻遏蛋白，抑制T5强启动子的表达。同时，pREP4还赋予宿主菌株卡那霉素抗性。pREP4是从pACYC改造而来的，含有p15A复制子。它能够与所有带ColE1复制起点的质粒共存。主要特点使用pUC19质粒检测，转化效率可达108，-80℃保存几个月转化效率不发生改变。recA1和endA1突变阻止对克隆DNA的修饰或对宿主菌染色DNA的重组，提高纯化质粒的产量和质量。M15化学感受态
