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重组人Flt3配体在哪些组织中可以表达
2021-5-22 阅读(294)
重组人Flt3配体属于Ⅲ型受体酪氨酸激酶家族成员。该家族的成员还包括c-KIT受体、血小板源生长因子受体和c-FMS受体等,该家族各成员的基因间具有较高的同源性。FLTS含有5个免疫球蛋白杨结构组成的胞外配体结合区,1个跨膜结构域,1个胞内近膜结构域,2个被插入结构域分开的激酶结构域和一个C端-结构域。
重组人Flt3配体在肝脏、脾脏、淋巴、脑、胎盘等组织中均有表达,在造血干细胞、前提B细胞、树突状细胞的增殖、分化和凋亡中起重要作用。另外,研究发现急性髓系白血病的发病往往伴随着FLT3的异常活化,因此FLT3或可作为急性髓系白血病的潜在治疗靶点。本品为重组蛋白(FC标签可以通过肠激酶切除),可用于单克隆抗体筛选或抗体功能验证。
通过重组人Flt3配体基因,建立其原核高效表达系统,为大规模获得rhFL产品,促进干细胞体外扩增移植等新技术在临床的应用创造条件.分离人外周血单个核细胞,提取总RNA,采用RT巢式PCR扩增可溶型FL基因,以双脱氧终止法进行DNA序列分析;将目的基因与pProEXHT载体连接,重组体引入大肠杆菌并在IPTG诱导下表达;亲和层析纯化表达产物,观察其刺激CD34+细胞增殖的情况.从人外周血单核细胞中克隆得到长481bp的rhFL基因,测序结果与已知人FL基因序列一致。