赛尔瑞成(北京)生命科学技术有限公司

中级会员·8年

联系电话

18513354055

您现在的位置: 首页> 技术文章 > 重组人GDF3操作步骤不会的看过来
中级会员·8年
人:
尤女士
话:
010-57325063
机:
18513354055
真:
010-57325063
址:
北京市昌平区超前路甲1号北控宏创科技园5号楼6层
址:
www.cell-regen.com

扫一扫访问手机商铺

重组人GDF3操作步骤不会的看过来

2021-6-8  阅读(298)

分享:
   重组人GDF3原核表达在表达当中来说还是比较简单,细菌培养条件简单、生长速度快,需要的仪器和培养基都比较便宜。当然,它也存在一些缺乏高级修饰、细胞内部还原性过高等缺点。原核表达从一开始的设计就非常重要,所谓好的开始是成功的一半。要根据是否要求可溶将载体分成两大类,可以同时尝试多种表达系统,也有许多商业化的系统供选择。
  重组人GDF3操作步骤:
  1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
  2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
  3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
  4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
  5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
  6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
  7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
  8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
  9.在450nm波长处测定各孔的OD值。
 

会员登录

×

请输入账号

请输入密码

=

请输验证码

收藏该商铺

X
该信息已收藏!
标签:
保存成功

(空格分隔,最多3个,单个标签最多10个字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我们将在第一时间回复您~
产品对比 二维码 在线交流

扫一扫访问手机商铺

对比框

在线留言