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你知道几个荧光检测器检测的必要参数

阅读:2615      发布时间:2022-4-22
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   荧光检测器是液相色谱系统的“眼睛”,测量离开柱的样品的浓度或质量。光电检测器测量柱流出物的光吸收、荧光和折光率的变化。电化学和电导检测器溶液的变化。其灵敏度在目前常用的HPLC检测器中高,在HPLC中应用较多。能发射荧光的物质或能用柱前或柱后衍生法转变成荧光衍生物的物质均可以使用荧光检测器进行分析。
  激发波长和发射波长是荧光检测的必要参数。选择合适的激发波长和发射波长,对检测的灵敏度和选择性都很重要,尤其是可以较大程度地提高检测灵敏度。
  荧光属于光致发光,需选择合适的激发光波长(Ex)以利于检测。激发波长可通过荧光化合物的激发光谱来确定。激发光谱的具体检测办法是通过扫描激发单色器,使不同波长的入射光激发荧光化合物,产生的荧光通过固定波长的发射单色器,由光检测元件检测。zui终得到荧光强度对激发波长的关系曲线就是激发光谱。在激发光谱曲线的zui大波长处,处于激发态的分子数目zui多,即所吸收的光能量也zui多,能产生zui强的荧光。当考虑灵敏度时,测定应选择zui大激发波长。
  一般所说的荧光光谱,实际上仅指荧光发射光谱。它是在激发单色器波长固定时,发射单色器进行波长扫描所得的荧光强度随荧光波长(即发射波长,Em)变化的曲线。荧光光谱可供鉴别荧光物质,并作为荧光测定时选择合适的测定波长的依据。

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