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重组人BMP4的制备工艺说明如下:1.基因构建与表达载体选择基因合成或克隆:从人体组织中提取总RNA,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等技术获得BMP-4的cDNA。或者根据已知的BMP-4基因序列进行人工合成。将获得的BMP-4基因片段插入到合适的表达载体中,如质粒载体,构建重组表达载体。常用的表达载体包括pET系列、pcDNA系列等,这些载体通常含有启动子、选择标记基因和多克隆位点等元件,以便于后续的基因表达和筛选。表达宿主选择:可以选择大肠杆菌、酵母细胞、哺乳动物细胞等作为表达宿主。
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以下是一些检测重组人BMP4活性的方法:1.细胞水平检测碱性磷酸酶活性检测:BMP-4可以诱导细胞产生碱性磷酸酶。将重组人BMP-4与特定的细胞系共同培养,如ATDC-5细胞等,在一定时间后,通过检测细胞内碱性磷酸酶的活性来反映BMP-4的活性。常用的方法是采用比色法或化学发光法等检测碱性磷酸酶对特定底物的催化作用,从而确定其活性水平。细胞增殖和分化检测:BMP-4能够促进间充质干细胞等向成骨细胞、软骨细胞等方向增殖和分化。将重组人BMP-4作用于间充质干细胞等靶细胞,经过一段时间的培养后,通过
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重组蛋白纯化是生物学研究中的一项关键技术,旨在从生物体中分离并纯化目标重组蛋白,以便研究其特定功能和结构。重组蛋白纯化的意义:1.提高蛋白质纯度:通过一系列分离和纯化步骤,去除细胞裂解液中的杂质和非目标蛋白,从而获得高纯度的重组蛋白。2.保障实验结果准确性:高纯度的重组蛋白有助于减少实验误差,提高实验数据的可靠性和重复性。3.支持后续研究和应用:纯化的重组蛋白可用于结构解析、功能研究、药物筛选等多个领域的深入研究和应用。以下是对重组蛋白纯化要求的分析:1.亲和标签的选择:选择亲和标签时需要考虑的
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重组蛋白纯化是生物制药过程中的关键步骤,其目的在于从复杂的生物混合物中提取出高纯度的目标蛋白。重组蛋白纯化的工艺过程涉及多个阶段,以下是对这些阶段的详细介绍:1.样品准备预处理:在准备好所有设备及耗材后,对目的蛋白进行预处理,去除杂质、组织、脂肪等,保证样品的生物活性。裂解细胞:如果目标蛋白存在于细胞内,需要通过机械或化学方法裂解细胞,释放出目标蛋白。2.初步分离离心:利用离心技术将大部分细胞碎片和未破裂的细胞分离出去。过滤:通过过滤器进一步去除较大的杂质颗粒。3.层析法纯化离子交换色谱:基于蛋
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重组人/小鼠FGF8b重组人/小鼠成纤维细胞生长因子8b背景介绍成纤维细胞生长因子8(fibroblastgrowthfactor8,FGF8)是成纤维细胞生长因子(FGFs)家族的成员之一。在原肠胚时期和与细胞的早期分化过程中起着重要作用,并与脑、颅面器官、脏器、骨骼、四肢的形成有着重要的关系,是胚胎发育中重要的生长因子。在正常成人体内,FGF8于肾脏、前列腺、睾丸、乳腺、骨髓和外周血白细胞中低水平表达。但在前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌与某些炎症部位FGF8呈现过量表达。进一步研究发现,其对激素依
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Human OSM(重组人抑瘤素M,Oncostatin M)-赛尔瑞成
HumanOSM(重组人抑瘤素M,OncostatinM)-赛尔瑞成背景介绍1986年Zarling等从PMA活化U937细胞培养上清中分离纯化到一种因子,这种因子有明显抑制A375人黑素瘤细胞生长而命名为抑瘤素-M(oncostatinM,OSM)。OSM属于白细胞介素-6家族成员,它主要由免疫细胞产生,例如活化的T淋巴细胞、单核细胞和巨噬细胞等。OSM是一种参与调节中枢神经系统的发育、骨组织代谢、肝脏再生、诱导心肌细胞的去分化、调节内皮细胞产生其他细胞因子和生长因子,并刺激血管生成的多效性分 -
细胞因子新品∣高活性重组人激活素A(recombinant human Activin A)
背景介绍激活素A(ActivinA)是一种功能强大的多功能细胞因子,属于转化生长因子-β(TGF-β)超家族的成员。ActivinA广泛表达于各种细胞和组织中,具有很强的生物活性,作用广泛,功能多样,是迄今为止研究最多的激活素。ActivinA发挥作用时,首先与表面II型激活素受体(ActIIRA或ActRIIB)结合,随后募集和磷酸化I型激活素受体(ActRI),磷酸化的ActRI又进一步激活Smad2和Smad3。ActivinA主要通过Smad2/3蛋白发出信号,它们与Smad4形成复合物 -
细胞因子新品∣高活性重组人抑瘤素M (Oncostatin M,OSM)
背景介绍1986年Zarling等从PMA活化U937细胞培养上清中分离纯化到一种因子,这种因子有明显抑制A375人黑素瘤细胞生长而命名为抑瘤素-M(oncostatinM,OSM)。OSM属于白细胞介素-6家族成员,它主要由免疫细胞产生,例如活化的T淋巴细胞、单核细胞和巨噬细胞等。OSM是一种参与调节中枢神经系统的发育、骨组织代谢、肝脏再生、诱导心肌细胞的去分化、调节内皮细胞产生其他细胞因子和生长因子,并刺激血管生成的多效性分子。目前的体外研究已证明,OSM在造血、细胞生长分化、炎症反应、代谢