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真核细胞重组蛋白表达及纯化服务各种蛋白的纯化技巧
2022-4-22 阅读(1442)
真核细胞重组蛋白表达及纯化服务各种蛋白的纯化技巧：
天然大分子蛋白分离纯化：
结合待分离的蛋白理化性质，适当选用适合孔径的分子筛截留分离纯化，配合阴离子柱或阳离子柱，使用HLPC分离设备，收取洗脱峰，可以获得纯度95%以上的天然蛋白。
天然小肽分离纯化：
通过分子筛初步截留大分子蛋白，使用大孔树脂或反向树脂纯化小分子化合物，进一步通过HPLC和MS对小肽分子鉴定，由于小肽分子一般含量较低，获得的蛋白量较少。
未知蛋白混合物分离纯化：
客户需告知带分离蛋白的基本特性，由钟鼎分离纯化，最终通过质谱鉴定，活性鉴定等多种方案确认分离产物。
真核细胞重组蛋白表达及纯化服务对样品的要求：
1.客户应提供准确的基因序列，明确蛋白标签及要求，告知蛋白用途。
2.客户提供载体质粒，最小量不得低于100ng，同时提供原始质粒图谱及序列文件，插入基因后重组质粒的测序报告。
3.委托纯化的重组蛋白应带有His-tag或GST-tag；带其他标签或无标签的重组蛋白，需另行商议纯化方法。
4.如实验需要，客户需提供重组蛋白序列、分子量、等电点、缓冲液成分及pH等信息。
