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哺乳动物瞬时表达受体细胞应具备的条件
2022-4-11 阅读(324)
哺乳动物瞬时表达广泛地应用于基因产物的快速表达及蛋白质的小规模制备等方面。细胞瞬时转染表达能够快速灵活的制备重组蛋白,细胞在转染后合适时机即能可收获并进行分析.在瞬时转染中,重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时高水平的表达。转染的DNA不必整合进宿主染色体,当有大量样品需要在短时间内分析时,尤其是在转染后1到4天内收获细胞,所得溶解产物用于检测目的基因的表达时,可以采用瞬时转染的方式。
哺乳动物瞬时表达适用于生成具有天然结构和活性的哺乳动物蛋白的选用表达平台,可以实现高水平的翻译后加工,使蛋白质获得最佳功能活性,适合在最类似生理学的环境中研究特定蛋白质的功能。它常用于抗体和治疗性蛋白质以及人类功能细胞分析的蛋白质表达。结构和性质更稳定:基于CHO和HEK293细胞的高密度表达。双重验证:常规和高密度瞬时表达组合鉴定。适用于高难度和低表达水平蛋白。表达水平提高:产量提高可达 100倍,重组抗体可高达 3g/L。生产周期快:从序列到蛋白/抗体仅需10周。
哺乳动物瞬时表达受体细胞应具备的条件:
遗传稳定性:外源基因多次传代后不至于丢失,易于长期保存。
细胞系特征:丧失细胞接触抑制和锚地依赖特征,便于大规模培养。
安全性能好:不合成分泌致病物质,不致癌。
合适的标记:便于转化株的筛选和维持。
生长快且齐:分裂周期短,生长均一,便于控制。