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真核表达细胞启动子介绍及作用分析
2021-8-23 阅读(2060)
真核表达细胞的优点：重组DNA易转染，遗传稳定，可重复；识别和去除内含子；进行翻译后修饰；磷酸化、糖基化、二硫键、寡聚体等的形成、高级结构的正确折叠；产品的构型正确率高，可被改造成类人体源性， 免疫源性好；可分泌至培养基，提纯工艺简单，成本低；可用于基因治疗。细胞表达系统能诱导高效表达，对表达的蛋白进行正确折叠，并进行复杂糖基化修饰，蛋白活性接近于天然蛋白，不需去除内毒素，周期较长，操作复杂，需要细胞房，无菌，成本投入高。
真核表达细胞启动子介绍及作用分析: RNA聚合酶(II)结合并起动转录的DNA序列。
一般包括转录起始点及其上游约100-200bp序列，包含有若干具有独立功能的DNA序列元件，每个元件约长7-30bp。
核心启动子元件: RNA聚合酶起始转录所必需的最小DNA序列，包括转录起始点及其上游-25/-30bp处的TATA盒。单独起作用时只能确定转录起始位点和产生基础水平的转录。
上游启动子元件包括通常位于-70bp附近的CAAT盒和GC盒、以及距转录起始点更远的上游元件。与相应的蛋白因子结合改变转录效率。不同基因具有不同的上游启动子元件组成，其位置也不相同，即不同的基因表达分别有不同的调控。
