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双光束紫外可见分光光度计核心结构与光路设计

时间:2025-4-11 阅读:309
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一、核心结构与光路设计

  1. 光源系统
    • 氘灯:提供紫外区(190-400nm)光源,适用于核酸、蛋白质等生物大分子分析。
    • 钨灯:提供可见光区(400-1100nm)光源,适用于有机化合物、金属离子等分析。
    • 双光源切换:通过光路切换装置自动选择光源,确保全波段覆盖。
  2. 分光系统
    • 单色器:采用光栅分光技术,将复合光分解为单色光,波长精度±0.3nm。
    • 波长扫描:通过光栅转角控制实现190-1100nm连续扫描,扫描速度可达2400nm/min。
  3. 双光束光路
    • 光束分配:单色光经旋转扇形镜或切光器快速交替分为两束:
      • 参比光束:通过参比池(盛装空白溶剂)。
      • 样品光束:通过样品池(盛装待测溶液)。
    • 同步检测:两束光最终汇聚至同一检测器(光电倍增管),确保测量同步性。

二、信号检测与数据处理

  1. 检测器工作原理
    • 光电倍增管:将光信号转换为电信号,灵敏度达10⁻¹⁵A。
    • 前置放大器:将微弱电流信号放大为电压信号,便于后续处理。
  2. 信号处理流程
    • 对数运算:电子系统对参比光与样品光信号进行对数运算,直接输出吸光度(A):

      其中,为参比光强度,为样品光强度。
    • 实时校正:通过参比光信号补偿光源强度波动、检测器漂移及电子噪声。

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