活细胞与死细胞区分染色试剂盒：对活细胞进行染色，区分活细胞和死细胞

区分活细胞和死细胞是在研究细胞生长调控机制以及细胞死亡机制和途径时常见且非常重要的任务。  

AkrivisBio的即用型试剂让这一过程变得简单。我们结合了一种专有的细胞可渗透的绿色荧光染料来染色活细胞，以及一种红色非渗透性染料——碘化丙啶（propidium iodide），用于染色所有细胞。染色后的细胞可以通过荧光显微镜进行观察。试剂盒提供了足够用于4片24孔板的材料。

艾美捷活细胞与死细胞区分染色试剂盒：

货号：COS-0103

规格：包含用于染色4片24孔板的试剂。

样本类型：贴壁细胞或悬浮细胞

适用物种：所有

检测方法：荧光显微镜

检测类型：定性检测

应用：用于对活细胞进行染色，以便在荧光显微镜下方便地区分活细胞和死细胞。

储存条件：-20°C

运输温度：冰凝胶包运输

保质期：自发货之日起一年

活细胞与死细胞区分染色试剂盒成分：

-活细胞染料：50微升，绿色（COS-0103-A）  

-全细胞染料：50微升，红色（碘化丙啶，COS-0103-B）  

-染色缓冲液：50毫升（COS-0103-C）  

储存和稳定性：

未开封的试剂盒应储存于-20°C。染色缓冲液和全细胞染料（碘化丙啶）开封后可在4°C下储存。活细胞染料应始终储存于-20°C。

染色步骤：

1. 根据要染色的孔数准备足够的染色液。每个孔需要0.5微升活细胞染料、0.5微升全细胞染料和0.5毫升染色缓冲液。根据实验规模相应调整体积。  

2. 通过轻柔离心（500×g，5分钟）收集细胞（10⁶个）。移除并丢弃上清液。  

3. 加入500微升染色液，轻轻重悬细胞沉淀。  

4. 在37°C下孵育15分钟。  

5. 将细胞悬液转移到载玻片上，并用盖玻片覆盖细胞悬液。放置在显微镜载物台上进行观察。  

注意：对于贴壁细胞，可以直接在盖玻片上培养。染色时，倾斜并移除培养基，然后放平，加入0.5毫升染色液并孵育15分钟。将盖玻片倒置在载玻片上，放置在显微镜载物台上。  

6. 使用能够检测荧光素和罗丹明的带通滤光片（排除较短波长）的荧光显微镜立即观察细胞。  

-活细胞会被细胞可渗透的活细胞染料染成绿色荧光（激发波长488纳米；发射波长518纳米）。  

-死细胞染料会将活细胞和死细胞都染成红色（激发波长488纳米；发射波长615纳米），从而呈现出黄色-红色的混合外观。  

注意：不同细胞类型的染色条件有所不同，因此需要手动调整条件以找到两种染料的合适浓度。碘化丙啶是一种疑似致癌物，操作时需格外小心。