资料简介
伯乐 CFX96 荧光定量 PCR 仪详尽介绍
一、产品概述
CFX96 实时荧光定量 PCR 仪是由 Bio-Rad(伯乐公司)推出的基因扩增与定量分析设备,属于CFX系列产品之一。该设备结合了高精度温控系统与多通道光学检测模块,广泛应用于生命科学研究、临床辅助诊断、食品安全检测、环境监测及农业遗传分析等领域。
CFX96 是该系列中的标准96孔通量型号,其设计强调样品间一致性、数据分析灵活性以及操作流程的便利性,适用于高重复性和中高通量需求的实验场景。
二、荧光定量PCR技术原理
荧光定量PCR(Real-Time Quantitative PCR,qPCR)技术是基于传统PCR技术发展起来的一种实时检测扩增产物的方法,利用荧光信号变化来监控PCR反应进程。其基本流程包括:
DNA模板扩增:通过热循环进行DNA的指数扩增;
荧光信号采集:在每一循环末端采集荧光信号,与目标扩增产物浓度相关;
数据分析:通过Ct值(循环阈值)与标准曲线计算初始模板数量;
结果展示:软件可输出熔解曲线、扩增曲线、相对表达量分析等数据图谱。
CFX96 将荧光检测与温控系统紧密结合,使用户能够实时掌握扩增反应的全过程。
三、CFX96 主要技术参数
参数类别 | 技术指标 |
---|---|
通量 | 96孔标准PCR板 |
每孔反应体积 | 10–50 μL |
温控范围 | 30–100°C |
升温/降温速率 | 最大5.0°C/s |
温控精度 | ±0.2°C(孔间差异<±0.4°C) |
荧光通道 | 标准配备5通道(FAM, HEX/VIC, ROX, Cy5, Quasar 705) |
光源 | 固态LED |
检测器 | 光电二极管阵列 |
数据输出 | .xls, .csv, .pdf等格式 |
软件功能 | 多重定量分析、基因分型、熔解曲线分析、相对/绝对定量等 |
接口 | USB、以太网口,可远程控制与数据传输 |
四、仪器结构与核心组件
1. 热循环系统
CFX96 采用高性能Peltier热电加热器,结合96孔铝质加热模块,提供快速且均一的温度变化,确保所有孔位的扩增条件一致。
2. 光学检测系统
CFX96 配备多通道荧光检测系统,通过顶部滤光系统进行荧光激发与信号采集。每个通道配置独立LED光源与检测滤片,可避免信号串扰,实现多重靶标同步检测。
3. 软件平台(CFX Manager)
用户可通过CFX Manager软件进行实验设计、运行监控、数据分析及报告导出。软件支持自动建模、标准曲线生成、表达量归一化和基因分型分析等。
五、应用领域
CFX96 适用于以下研究与检测领域:
1. 分子生物学研究
基因表达分析(qRT-PCR)
miRNA定量
转录因子活性监测
2. 临床检测研究
病原体核酸定量
肿瘤标志物分析
药物代谢基因检测
3. 食品安全与农业
转基因成分定量检测
食源性致病菌筛查
作物基因多态性研究
4. 环境微生物分析
水质与土壤中微生物DNA定量
环境抗性基因检测
六、使用维护建议
为确保CFX96设备长期运行稳定,用户需关注以下事项:
日常维护
使用前检查热盖与光学组件,避免灰尘污染;
实验结束后清理样本残液,保持孔板区域干燥;
定期校准光学系统与温控模块。
软件管理
保持CFX Manager软件更新至最新稳定版本;
定期备份实验数据及分析报告;
正确设定用户权限,避免误操作。
操作规范
孔板与密封膜选择需与仪器兼容;
控温前进行热盖预热,防止冷凝;
荧光通道设定避免染料重叠,以免影响分析结果。
七、CFX96 与其他型号对比
项目 | CFX96 | CFX384 | ABI QuantStudio 5 | Roche LightCycler 480 |
---|---|---|---|---|
孔数 | 96 | 384 | 96/384(型号不同) | 96/384 |
光学通道 | 5 | 5 | 4/5 | 6 |
软件界面 | 图形化、模块化 | 同CFX96 | 依型号变化 | 专业功能丰富 |
优势 | 温控一致性好,数据输出灵活 | 高通量 | 系统整合度高 | 多重检测能力强 |
八、二手CFX96选购参考建议
由于CFX96耐用性良好,部分实验室转让设备时状态仍较理想。选择二手设备时可从以下方面评估:
1. 设备状况
样品孔板是否磨损;
热盖开启是否顺畅;
各通道荧光强度是否均一;
检查系统运行是否有报错提示。
2. 检测报告
要求卖家提供:
温控一致性报告;
荧光校准数据;
模拟实验Ct值稳定性测试。
3. 软件与许可证
确认CFX Manager是否可正常安装与授权;
如为旧版本,可联系Bio-Rad代理了解兼容性问题。
4. 技术支持
优先选择提供短期质保与培训服务的渠道;
了解是否可购买耗材(如原装密封膜、孔板);
确认是否兼容现有实验室PC环境。
九、常见问题与解答
Q1:是否可用于多重荧光探针分析?
A:可支持5色通道并行检测,适合常规TaqMan探针、SYBR Green以及其他染料组合的多重反应。
Q2:CFX96是否可进行熔解曲线分析?
A:支持熔解曲线检测,适用于SNP分型、特异性验证等应用。
Q3:是否支持远程控制?
A:具备网络连接功能,通过以太网或局域网可实现远程监控、数据传输与操作。
十、结语
伯乐 CFX96 荧光定量PCR仪作为实验室常用的实时扩增平台之一,凭借稳定的温控系统、多色荧光通道、友好的用户界面,在科研与检测领域均有广泛应用。对于二手市场的设备,在合理评估和维护的前提下,依然可以发挥可靠性能,满足多样化的实验需求。
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