资料简介
以下是天津本生牛白细胞介素10(IL-10)ELISA试剂盒的实验说明书核心内容整理,综合多个来源信息:
检测原理
采用双抗体夹心法(ELISA):
预包被抗牛IL-10抗体的微孔板捕获样本中的目标蛋白。
加入HRP标记的检测抗体形成复合物,TMB显色(蓝色→黄色)。
通过450nm波长测定OD值,计算浓度。
样本处理要求
类型:血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆。
处理方法:
血清/血浆:3000转离心10-30分钟分离,避免溶血或高脂血。
组织匀浆:生理盐水捣碎后离心取上清。
保存:分装后-20℃冻存,避免反复冻融。
试剂盒组成
组分 规格/数量 备注
预包被微孔板 12孔×8条 可拆卸
标准品 0.5ml(浓度梯度) 需稀释
HRP标记抗体 6ml 避光保存
TMB显色液 A液+B液各6ml 现配现用
终止液 6ml 酸性溶液
浓缩洗涤液 20ml(30倍稀释) 使用前稀释
操作步骤
平衡试剂:室温放置15-30分钟。
标准品稀释:按说明书梯度稀释(如40ng/L→20ng/L→10ng/L)。
加样与孵育:
加入标准品或样本(100μl/孔),37℃孵育60分钟。
洗涤:手工或自动洗板5次。
显色与终止:
加入TMB避光反应15分钟,终止后立即检测OD值。
注意事项
灵敏度与范围:典型检测范围15.6-1000 pg/mL,灵敏度因品牌差异。
交叉反应:与牛IL-10类似物无显著交叉。
保存条件:未开封试剂盒2-8℃保存,开封后板条需密封防潮。
禁止检测:含NaN3的样本(抑制HRP活性)。
数据计算
以标准品OD值绘制曲线,拟合方程计算样本浓度。
注:以上资料仅供参考,如需完整说明书,请参考试剂盒附带文档或联系供应商。
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