资料简介
prm质谱检测技术服务详情介绍
平行反应监测(Parallel Reaction Monitoring, PRM)是一种基于高分辨率、高精度质谱的离子监测技术。该技术的原理与SRM/MRM相当,但在蛋白质和肽的juéduì定量测定开发中更方便。它zuì适合通过阿托摩尔水平检测对复杂样品中的多种蛋白质进行定量。PRM技术是一种新型的无抗体蛋白验证技术,用于对label free、iTRAQ、TMT、SILAC等相对定量蛋白质组数据进行验证,或者对复杂样品中的目标蛋白进行靶向定量分析。
PRM分析原理
PRM基于Q-Orbitrap作为代表性的四极杆高分辨率质谱平台。与一次执行一个跃迁的 SRM 不同,PRM 对前体离子的每个跃迁执行全扫描,即并行监测前体离子的所有碎片。首先,PRM采用四极杆(Q1)选择母离子,选择窗口通常为m/z≤2;然后,前体离子在碰撞室(Q2)中碎裂;zuì后,Orbitrap 取代了 Q3,以高分辨率和高精度扫描所有产物离子。因此,PRM技术不仅具有SRM/MRM目标的定量分析能力,而且还具有定性能力。(1)质量精度可达ppm级,比SRM/MRM更能消除背景干扰和假阳性,有效提高复杂背景下的检出限和灵敏度;(2) 产物离子全扫描,无需选择离子对和优化裂解能,更容易建立分析;(3)更宽的线性范围:提高到5-6个数量级。
图1
基本构成
质谱的基本原理是利用质谱仪将样品中的分子离子化,并根据它们在磁场中的质量/电荷比(m/z)分离和检测。其基本构成包括:
1.离子源(Ionization Source):
将分析样品中的分子转化成离子的装置。常用的离子化方法包括电离、化学离子化、激光脱附等。
2.质量分析器(Mass Analyzer):
根据分子的质量对其进行分离和筛选。常见的质量分析器包括飞行时间质量分析器、四极质量分析器、离子阱等。
3.检测器(Detector):
用于测量离子流的强度和质量。检测器可以是光电倍增管、电子倍增器等。
4.数据处理系统(Data System):
用于记录和处理质谱数据,通常与计算机系统连接,进行数据分析和解释。
PRM技术亮点
在高通量检测过程中,保证定量的灵敏度和特异性。
与SRM相比,它不需要母离子/碎片离子对,只需要母离子信息,使得实验设计更加简单。
它可以通过二次全扫描进行定性和定量分析,在复杂背景下表现出强大的抗干扰性和高分辨率。
可以根据需要选择性地掺入合成的标准肽,从而节省实验成本。
PRM技术具有出色的重现性,确保多次重复测试结果的稳定性。
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