用于提取酵母细胞中的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料的*新型材料,专一吸附DNA,可zui大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。若酵母蛋白抽提试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65度水浴中重新溶解后再使用,不影响提取效果。如果实验中的离心步骤出现柱子堵塞的情况,可适当延长离心时间。酵母蛋白抽提试剂盒利用了氯化苄的这一特性,将植物样品冻结融解后,再使用将植物样品在壁上数次按压即可破坏细胞壁。本法与传统方法相比,省去了液氮研磨等烦琐步骤,有利于一次性处理大量样品。
酵母蛋白抽提试剂盒经过了改良,热处理时间只需15分钟,使用其从实验开始至水相回收只需30分钟时间。得到的基因组DNA可以进行PCR扩增及限制酶处理等。依次加入生物素化的抗人CRP抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人CRP抗体与结合在包被抗体上的人CRP结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入发光底物混合液,发光底物在辣根过氧化物酶的催化下发出荧光,用化学发光免疫分析仪测定化学发光值,CRP浓度与化学发光值之间呈正相关,通过绘制标准曲线求出标本中CRP的浓度。
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