二手赛默飞荧光定量PCR仪QuantStudio 3(Q3)使用价值与技术解析
一、引言
荧光定量PCR(qPCR)是一种广泛应用于基因表达分析、病原体检测、SNP 分型、拷贝数变异(CNV)研究等领域的分子生物学技术。美国赛默飞世尔科技(Thermo Fisher Scientific)旗下的Applied Biosystems(ABI)系列是其中一个被广泛使用的qPCR平台品牌,其推出的QuantStudio系列因其系统稳定性、操作便捷和扩展能力等特点,在众多科研及检测机构中得到较多应用。
QuantStudio 3(简称Q3)是该系列入门型号之一。相较于高通量版本如QuantStudio 5/6/7 Pro,Q3定位于常规科研、教学实验室及中等通量需求场所。本文将以二手Q3设备为研究对象,从仪器构成、运行机制、技术性能、操作流程、应用范围、数据输出、维护要点、二手市场价值、适用实验场景及采购建议等多个方面进行全面介绍,旨在帮助用户科学判断其在当前实验需求中的适配度。
二、仪器构成与基本参数
1. 主机结构
QuantStudio 3 qPCR系统整合热循环模块与荧光检测光路为一体,采用封闭式光学系统。其结构紧凑,便于放置于标准实验台面或生物安全柜中。外壳材质为ABS复合材料,兼具机械强度与轻便性。主机顶部为样品仓,配有自动加热盖;正面嵌入彩色触控屏用于运行设置和状态查看。
2. 热循环模块
样品通量:标准96孔(0.2 mL管或96孔板)
升温速率:约3.0 °C/s
降温速率:约3.0 °C/s
温度均一性:±0.25 °C(30 秒内)
温控精度:±0.15 °C
加热盖温度:默认设置为105 °C,可调范围90–110 °C
3. 光学检测系统
QuantStudio 3 配备6通道光学检测模块,支持多重荧光通道采集。
通道 | 激发波长(nm) | 发射波长(nm) | 适用染料(常用) |
---|---|---|---|
Channel 1 | ~470 | ~514 | SYBR Green / FAM |
Channel 2 | ~520 | ~558 | VIC / HEX |
Channel 3 | ~550 | ~580 | NED / TAMRA |
Channel 4 | ~620 | ~645 | ROX / Texas Red |
Channel 5 | ~650 | ~682 | Cy5 |
Channel 6 | ~700 | ~720 | Optional dyes |
ROX通道可用于荧光校正(Passive Reference)。该系统不需用户更换滤光片,所有通道在同一次反应中可自动切换采集。
三、系统软件与数据分析能力
1. 软件平台
QuantStudio 3 配套使用Design & Analysis Software(DA软件),支持Windows平台。用户可通过触屏或远程PC登录方式进行程序设置与结果分析。软件界面图形化程度较高,便于初学者快速掌握。
主要功能包括:
实时荧光曲线显示
Ct值自动计算
基线和阈值自动调整
熔解曲线分析
相对表达分析(ΔΔCt)
绝对定量分析(标准曲线法)
拷贝数变异分析
荧光信号平滑与背景扣除功能
2. 数据导出格式
支持导出结果至CSV、TXT、PDF、Excel等格式,方便在第三方软件(如GraphPad Prism、SPSS等)中进行后续统计分析。也可将原始实验数据包(.eds格式)导入更高级的分析平台(如Thermo Cloud)进行远程存储和多用户协作。
四、典型应用场景
QuantStudio 3 适合下列实验类型:
基因表达定量:相对定量(如炎症因子IL-6、TNF-α表达比较)、绝对定量(如病毒载量评估)。
突变检测与SNP分型:配合探针法识别碱基替换,适合小规模遗传筛查。
微生物与病毒检测:在食品安全、临床分子诊断(如HBV、SARS-CoV-2 qPCR筛查)中可用于常规阳性/阴性判断。
拷贝数变异(CNV)分析:需配合标准化引物探针库。
教学与培训实验:适合高校生命科学、医学等专业教学平台入门使用。
五、操作流程简要
典型qPCR实验操作流程如下:
模板与反应体系准备:DNA/cDNA样本、引物、荧光染料或探针,配置总反应体系体积(20 µL或25 µL)。
装板并封板:使用0.2 mL反应管或96孔PCR板,封板膜密封,避免蒸发。
插入仪器并设定程序:
酶激活(95 °C,2–10 min)
扩增循环(95 °C 15 s,60 °C 60 s ×40 cycles)
选择染料、设置检测通道;
开始运行与实时监控;
结果导出与分析:Ct值计算、图像保存、熔解曲线判断。
六、维护与日常检查
虽为二手设备,QuantStudio 3若保养得当,其运行寿命依然可持续5–8年。
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