细胞克隆筛选系统是基于多种技术实现对目标细胞克隆筛选的。其中,荧光标记技术是关键之一。通过将特定的荧光蛋白或荧光染料与目标基因或蛋白质偶联,使表达目标产物的细胞能够发出特定波长的荧光信号,从而在众多细胞中被识别出来。例如,在抗体制备中,可将编码抗体重链和轻链的基因分别与不同荧光蛋白基因融合表达,当细胞成功表达完整的抗体时,会同时显示两种荧光信号,以此作为筛选标志。
此外,图像分析技术也不可少。系统配备高分辨率的成像设备,能够捕捉细胞的形态、荧光强度等特征信息,并借助专业的图像分析软件对这些数据进行处理和分析,快速准确地判断细胞是否符合筛选标准。
细胞克隆筛选系统的主要类型及特点:
-高通量系统:这是一款专为哺乳动物细胞系开发设计的系统,拥有5组荧光通道,可同时使用3组,能够在短时间内自动化筛选并挑取更高水平表达的细胞克隆。它避免了传统的有限稀释方法,显著提高了筛选效率和克隆产量,节省了时间和成本。该系统简化了从初始克隆筛选到单克隆验证的整个过程,对于抗体开发和生物制药开发至关重要,可确保准确性与高效性。
-微生物克隆筛选系统:主要用于自动化合成生物学工作流程,可快速准确地选择和筛选微生物克隆,非常适合DNA组装、蛋白质工程和抗体开发等应用,具有可扩展性与高效性的特点。
一般包括以下几个步骤:将待筛选的细胞接种到合适的培养板或培养皿中,使其形成单克隆细胞群落。然后,对细胞进行荧光标记或采用其他可检测的标记方式,使目标细胞克隆具备可识别的特征。接着,将培养板放入细胞克隆筛选系统中,系统会自动对每个细胞克隆进行成像和分析,根据预设的筛选标准,如荧光强度、细胞形态等,识别出符合条件的目标克隆。该系统可以自动挑取这些目标克隆,转移到新的培养环境中进行进一步的培养和验证。

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