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精品啪啪一级免费视频 细胞冻存液的配方介绍

来源:普迈精医科技(北京)有限公司   2025年05月30日 16:40  
细胞冻存液是用于细胞冷冻保存的液体,它能够保护细胞在低温下不受损伤,尤其是在细胞冻结和解冻过程中。冻存液通常包含保护剂、缓冲液以及其他有助于维持细胞存活的成分。以下是常用的细胞冻存液配方及其成分:  
1.常见配方  
配方1:基础冻存液  
DMSO(二甲基亚硫酰胺):10%  
FBS(胎牛血清):90%  
这种配方是简单的冻存液,DMSO作为常用的细胞保护剂,可以有效防止细胞在冻结时形成冰晶,FBS提供了额外的保护和营养成分。  
配方2:改进冻存液(适用于敏感细胞)  
DMSO:5-10%  
FBS:50-80%  
PBS(磷酸盐缓冲液):10-20%  
这种配方的冻存液减少了DMSO的浓度,适合对于DMSO较敏感的细胞,FBS的比例保持较高。  
配方3:高浓度DMSO冻存液  
DMSO:20%  
FBS:70%  
PBS:10%  
这种配方适合对DMSO耐受性较好的细胞,能够提供更强的保护。  
2.冻存液的组成和作用  
二甲基亚硫酰胺(DMSO):作为细胞冻存液的主要保护剂,DMSO可以防止细胞内水分在低温下结冰,减少冰晶对细胞结构的破坏。它的浓度通常在5%-20%之间。  
胎牛血清(FBS):FBS中含有蛋白质、脂肪、维生素、矿物质等,能够为细胞提供营养,增强冻存过程中的细胞生存率。  
PBS:用于维持冻存液的pH值和渗透压,确保细胞能够在低温环境下存活而不受损。  
3.冻存步骤  
制备冻存液:根据所用细胞的特点选择合适的冻存液配方。  
离心与重悬:将细胞进行离心,然后将其重悬在冻存液中,确保细胞浓度适宜(通常为1-10×10^6个细胞/mL)。  
分装:将细胞冻存液分装到冻存管中,确保每个冻存管中细胞量适当。  
缓慢冷冻:使用程序降温设备将细胞缓慢降温至-80°C,一般每分钟降温1°C至-80°C,再转移至液氮保存。  
存储:将冻存管放入液氮中进行长期保存。  
4.注意事项  
DMSO浓度:DMSO浓度过高可能对细胞造成毒害,因此应根据细胞类型选择合适的浓度。  
缓慢冷冻:缓慢的冷冻过程能够使水分缓慢结晶,减少对细胞的伤害。程序降温仪器通常有内建的逐步降温程序。  
解冻过程:解冻时要迅速进行,避免细胞长时间暴露在高浓度的DMSO中,从而降低其存活率。  
通过适当的冻存液配方和冷冻过程,可以显著提高细胞在冻存过程中的存活率,并确保它们在解冻后能够恢复正常功能。

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