细胞计数对于细胞浓度和活力的可重现和准确记录非常重要,可用于一系列研究、医学和生物技术应用。尽管台盼蓝存在许多记录在案的问题和局限性,但它仍然被广泛用于许多研究实验室。本文旨在重点介绍赤藓红素 B,这是一种毒性较小且无忧的台盼蓝细胞活力染料替代品。
了解台盼蓝
但首先,让我们了解台盼蓝的局限性。该列表的最顶部是台盼蓝对人和细胞的毒性。台盼蓝会因染料吸收而随着时间的推移降低细胞活力。建议在混合样品后尽快计数细胞。大量研究还表明,台盼蓝具有潜在致癌性,可导致细胞周期和细胞死亡调节发生变化 (1-6)。因此,它被贴上了对动物和环境有害的标签。
台盼蓝在储存过程中容易沉淀,在血球计数器和/或自动细胞计数仪上计数时可能表现为碎片。保持台盼蓝的清洁需要加热、过滤或离心以去除晶体,以避免干扰细胞计数或错误表征细胞。此外,细胞样品中存在碎片使得区分无核细胞与真碎片、死细胞或晶体极为困难。由于这些限制,它可能导致个体高度主观计数和自动细胞计数不准确。对于活力低于 80% 的样品尤其如此。此外,台盼蓝还可以与培养基或血清中的蛋白质结合,这会干扰其与死细胞的适当结合亲和力。
以上所有情况都可能导致在研究的许多关键点为优化或标准化用于药物开发、细胞治疗或数据生成的方案收集的数据不一致。
介绍赤藓红 B,台盼蓝的替代品
介绍赤藓红素 B,一个更好、更明亮的选择! 赤藓红素 B 在国际上用作低剂量的食品添加剂,被归类为无毒。它是一种生物安全染料,用于染料排斥测试以测量细胞活力。与台盼蓝类似,该测定基于以下原理:具有完整细胞膜的活细胞会排除染料的极性分子并保持未染色,而膜受损的死细胞则不会,因此看起来更暗。
赤藓红 B 细胞活力检测依赖于与台盼蓝检测相同的原理,其中活细胞排除染料,而受损细胞被染色。然而,与台盼蓝相比,赤藓红素 B 的一些优势包括与细胞混合时毒性较低、在不同温度和储存条件下的稳定性以及减少血清蛋白的结合。赤藓红素 B 相对于台盼蓝的这些优势显著减少了在细胞活力和群体密度测定过程中导致细胞错误表征的变量。这会产生更准确和可靠的计数。
可以理解的是,一些研究人员仍然对从台盼蓝染色转向赤藓红 B 染色心存疑虑,因为台盼蓝历来是细胞计数的黄金标准方法。这通常是由于他们不愿意更改当前的协议。然而,赤藓红 B 可以使用相同的检测方案、硬件和类似的仪器设置来替代台盼蓝。台盼蓝和赤藓红素 B 之间也没有显着的价格差异。
结论
赤藓红素 B 是台盼蓝的毒性较小的替代品,具有多种优势,可实现更可靠的细胞计数。虽然台盼蓝是细胞计数的传统标准品,但研究表明,赤藓红 B 是一种易于使用、成本效益高且毒性较小的替代品。
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