产品推荐:气相|液相|光谱|质谱|电化学|元素分析|水分测定仪|样品前处理|试验机|培养箱

2025版仪器采购宝典电子书

化工仪器网>技术中心>解决方案>正文

欢迎联系我

有什么可以帮您? 在线咨询

【瑞士步琦】【应用】同一系统上使用Flash和制备HPLC色谱纯化多肽

来源:步琦实验室设备贸易(上海)有限公司   2025年05月29日 14:37  

同一系统上使用

Flash和制备HPLC色谱纯化多肽

色谱应用


1



简介

固相多肽合成(SPPS)是科学研究、临床和商业合成领域常见的多肽合成路径。由于反应通常产生多种长度的肽链,所以这些反应混合物的提纯非常具有挑战性。使用大孔反相填料色谱柱和制备 HPLC 能够得到高纯度的结果,所以常用于此类纯化。不过,多肽反应通常很复杂,含有很多杂质。将此样品引入昂贵的制备 HPLC 柱和系统中会产生额外的消耗,而且需要较多时间进行样品纯化。Pure Prep 系统既能运行制备 HPLC 也能运行 Flash 色谱模式,令您从容选择使用制备 HPLC 还是更经济的 Flash 色谱。FlashPure 大孔 Flash 柱填装高效的 20μm 粒径的填料,分离度高,这是分离很靠近的化合物分子诸如多肽等特别需要的。在此我们证明,如何在同一系统上使用 FlashPure Flash 柱和 HPLC 柱纯化复杂的多肽反应物,并使最终纯度超过95%。


2



实验材料和方法

样品

样品1(Flash色谱)

样品2(制备HPLC)

多肽混合物

25mg 反应混合物

15mg 反应混合物

目标多肽链长

20 个氨基酸

15 个氨基酸

多肽序列

CQQYNRPYXXXGGTKLEIKR-NH2

CAKHYYYGGXXXMDY-NH2


纯化

Flash 色谱

Prep 色谱

仪器系统

Pure flash 模式

Pure Prep 模式

Flash 柱芯/色谱柱

FlashPure WP C18 12g

Vydac 150HC,22×150mm,10um

梯度/检测器

A=水

B=乙腈+0.1%TFA

A=水

B=乙腈+0.1%TFA

进样模式

液体进样

液体进样


分析

分析型 HPLC

系统

Agilent 1200

色谱柱

Kromasil C18 100×4.6mm,3um

流动相

A=水+0.1%TFA

B=20%水,80%乙腈+0.1%TFA

梯度

样品1:20分钟内10-50%B

样品2:20分钟内15-55%B

检测波长

UV214nm

进样模式

液体进样-多种进样体积


3



结果与讨论



纯度结果

纯化前纯度

纯化后纯度

样品1(Flash 色谱纯化)

58.5%

95%

样品2(Prep 色谱纯化)

55.9%

98.9%


4



结论

通过以上实验证明:使用反相 Flash 柱和 HPLC 色谱柱,成功地在同一系统上进行了多肽纯化,得到纯度超过 95% 的馏分。高效大孔 Flash 色谱填料提供了堪比制备 HPLC 色谱柱水平的纯度,Pure Prep 系统既能够运行制备 HPLC 也能运行 Flash 色谱模式,您可以自如选择使用制备 HPLC 或更经济的一次性 Flash 色谱柱。

微信图片_20250106164342.jpg


免责声明

  • 凡本网注明“来源:化工仪器网”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:化工仪器网”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
  • 本网转载并注明自其他来源(非化工仪器网)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
  • 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。
企业未开通此功能
详询客服 : 0571-87858618