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GE Life FICOLL PAQUE PLUS高效淋巴细胞分离

来源:上海易汇生物科技有限公司   2025年05月29日 14:21  

GE Life FICOLL PAQUE PLUS高效淋巴细胞分离

在生命科学研究领域,对细胞进行高效、高纯度的分离是众多实验的关键起始步骤。GE Life 的 FICOLL PAQUE PLUS(货号 17144002)作为一款备受认可的细胞分离介质,在淋巴细胞分离等实验中发挥着重要作用,为科研人员提供了可靠的技术支持。

产品概述

FICOLL PAQUE PLUS 是一种无菌的即用型密度梯度介质 ,专为从人外周血中分离淋巴细胞而精心设计,在全球实验室中已成为体外研究的标准选择。它能助力科研人员获取高产率、高纯度的淋巴细胞,满足多种科研实验对细胞样本的严格要求。该产品的包装规格有多种,如常见的 6×100 mL 装,方便不同规模实验的需求。

核心技术原理

  1. 密度梯度离心原理:血液中各类细胞的密度存在差异 ,红细胞和多核白细胞比重较大,约为 1.092,而淋巴细胞和单个核细胞比重相对较小,在 1.075 左右。FICOLL PAQUE PLUS 的密度精准控制在 1.077±0.001 g/mL,这一密度恰好介于红细胞和淋巴细胞之间。当含有多种细胞的血液样本与 FICOLL PAQUE PLUS 混合后进行离心时,不同细胞会依据自身密度在离心力的作用下,在分离液中形成不同的层次,从而实现细胞的分离。

  1. 成分协同作用:其主要成分包括 9.0% (w/v) 的泛影葡胺钠、5.7% (w/v) 的 Ficoll PM400 以及 0.0231%(w/v) 的依地酸钙钠 。泛影葡胺钠可增加溶液的密度,有助于形成稳定的密度梯度;Ficoll PM400 作为一种高分子量蔗糖聚合物,能促进红细胞的凝集,使得红细胞在离心过程中更容易沉淀,从而与淋巴细胞更好地分离;依地酸钙钠则起到抗凝作用,防止血液样本在分离过程中发生凝固,保证细胞的完整性和活性。

产品性能优势

  1. 高纯度与高回收率:使用 FICOLL PAQUE PLUS 分离淋巴细胞,所得单核细胞含量可达 95 ±5% ,淋巴细胞得率为 60 ± 20%。这意味着科研人员能够从外周血样本中获取到高纯度的淋巴细胞,且细胞的回收率较高,为后续实验提供了充足且优质的细胞材料。无论是进行淋巴细胞功能研究,还是基于淋巴细胞的细胞治疗探索等,高纯度和高回收率的淋巴细胞样本都至关重要,能有效减少杂质细胞对实验结果的干扰,提高实验的准确性和可靠性。

  1. 良好的细胞活力维持:该产品在分离过程中能很好地维持淋巴细胞的活力 ,细胞存活率可达 95 ±5%。这得益于其温和的分离条件以及对细胞无明显毒性的成分。高活力的淋巴细胞对于需要细胞继续进行培养、增殖或功能检测的实验尤为关键,如淋巴细胞的体外刺激实验、细胞因子分泌检测等,只有保持细胞的高活力,才能真实反映淋巴细胞在生理状态下的功能和特性。

  1. 低内毒素水平:FICOLL PAQUE PLUS 的内毒素水平极低,小于 0.12 EU/mL 。内毒素的存在可能会对细胞产生毒性作用,影响细胞的正常生理功能,进而干扰实验结果。低内毒素水平保证了分离得到的淋巴细胞不受内毒素的污染和干扰,对于一些对内毒素敏感的实验,如细胞培养、免疫细胞功能研究等,能够提供更纯净、可靠的细胞样本,确保实验结果的准确性和可重复性。

  1. 操作简便快速:基于 Boyum 发展的方法,使用 FICOLL PAQUE PLUS 进行淋巴细胞分离仅需简单快速的离心操作 。科研人员只需将适量的血液样本小心铺加在 FICOLL PAQUE PLUS 分离液上方,然后放入离心机中,按照推荐的离心条件进行离心,即可实现细胞的分层分离。整个操作过程无需复杂的设备和繁琐的步骤,即使是实验新手也能快速上手,大大提高了实验效率,节省了科研时间。

与其他淋巴细胞分离方法的对比

对比维度
FICOLL PAQUE PLUS
红细胞裂解液法
流式细胞分选法
磁珠分选法
分离纯度
单核细胞含量 95 ±5%
纯度较低,易残留杂质
纯度高,但可能存在损失
纯度较高,特异性强
细胞活力
存活率 95 ±5%
对细胞有一定损伤
操作复杂,影响活力
可能影响细胞功能
操作难度
简单,仅需离心
步骤相对复杂
需专业设备与技术
需特定设备与操作
分离时间
较短
中等
较长
中等
成本
适中
较低
设备昂贵,成本高
磁珠成本较高
适用场景
常规实验
对纯度要求不高的实验
高纯度特殊需求实验
特定细胞亚群分离

1. 与红细胞裂解液法对比

红细胞裂解液法通过化学试剂裂解红细胞,从而实现淋巴细胞的分离 。然而,这种方法容易导致细胞碎片残留,分离得到的淋巴细胞纯度较低,难以满足对细胞纯度要求较高的实验。同时,裂解液对淋巴细胞也可能产生一定的损伤,影响细胞活力。相比之下,FICOLL PAQUE PLUS 利用密度梯度离心原理,能有效避免细胞碎片残留问题,且对细胞的损伤极小,在分离纯度和细胞活力方面具有明显优势。

2. 与流式细胞分选法对比

流式细胞分选法可根据细胞的物理和化学特性对淋巴细胞进行精准分选,纯度 。但该方法需要专业的流式细胞仪设备,操作过程复杂,对操作人员的技术要求较高,且分选过程可能会对细胞造成一定的机械损伤,影响细胞活力。此外,设备和试剂成本高昂,限制了其在常规实验室中的广泛应用。FICOLL PAQUE PLUS 操作简便,无需复杂设备,且能较好地维持细胞活力,对于大多数常规科研实验而言,是更经济、高效的选择。

3. 与磁珠分选法对比

磁珠分选法利用磁珠与特定细胞表面标志物的特异性结合,通过磁场作用分离淋巴细胞,可实现对特定细胞亚群的高效分离 。不过,磁珠与细胞的结合可能会影响细胞的功能,且磁珠成本较高。而 FICOLL PAQUE PLUS 无需依赖细胞表面标志物,能分离获得多种淋巴细胞亚群的混合样本,适用于对淋巴细胞整体研究的实验,且成本相对较低,操作更简便。

应用领域

  1. 免疫学研究:在免疫学研究中,淋巴细胞是核心研究对象 。FICOLL PAQUE PLUS 分离得到的高纯度、高活力淋巴细胞,可用于研究淋巴细胞的免疫应答机制,如 T 细胞和 B 细胞的活化、增殖、分化过程,以及它们在免疫防御、免疫调节中的作用。通过对淋巴细胞的深入研究,有助于揭示免疫系统的工作原理,为开发新型免疫治疗方法、疫苗等提供理论基础。例如,在肿瘤免疫治疗研究中,分离出的淋巴细胞可用于体外扩增和修饰,使其具备更强的抗肿瘤活性,再回输到患者体内,以达到治疗肿瘤的目的。

  1. 传染病研究:在传染病研究领域,淋巴细胞在机体对抗病原体感染的过程中发挥着重要作用 。利用 FICOLL PAQUE PLUS 分离患者外周血中的淋巴细胞,可用于研究淋巴细胞对病原体的免疫反应,包括淋巴细胞分泌细胞因子的类型和水平、淋巴细胞对病原体的杀伤能力等。这有助于深入了解传染病的发病机制,为开发针对性的治疗药物和疫苗提供关键线索。例如,在艾滋病研究中,通过对 HIV 感染者淋巴细胞的研究,可探索 HIV 病毒如何感染淋巴细胞以及淋巴细胞如何抵抗病毒感染,为寻找有效的艾滋病治疗方法提供方向。

  1. 血液学研究:在血液学研究中,淋巴细胞的数量和功能变化与多种血液疾病密切相关 。FICOLL PAQUE PLUS 可用于从患者血液样本中分离淋巴细胞,用于分析淋巴细胞在白血病、淋巴瘤等血液肿瘤中的异常表现,如细胞形态、免疫表型、基因表达等方面的变化。通过对这些异常的研究,有助于血液疾病的诊断、分型和预后评估,同时也为开发新的治疗策略提供依据。例如,在白血病的诊断和治疗监测中,准确分离和分析淋巴细胞的变化,对于判断病情进展和治疗效果具有重要意义。

产品使用说明

  1. 样本准备:使用 FICOLL PAQUE PLUS 时,建议使用新鲜采集的人外周血样本 。采血过程应严格遵循无菌操作原则,使用无热原、无内毒素的采血器材。采集后的血液样本若不能立即进行分离,可在室温下短暂保存,但不宜超过数小时,以免影响细胞活性和分离效果。若需长时间保存,可采用适当的抗凝剂处理后,在低温下保存,但应注意保存条件对细胞的影响。

  1. 实验操作流程:操作时,先将 FICOLL PAQUE PLUS 分离液小心转移至离心管中,注意不要产生气泡 。然后用移液器将稀释后的血液样本缓慢铺加在分离液上方,形成清晰的界面。血液与分离液的体积比推荐为 2:3 。将离心管放入离心机中,按照推荐的离心条件(如室温下,以特定转速离心一定时间,具体参数可参考产品说明书)进行离心。离心结束后,可观察到明显的细胞分层,位于分离液界面上的白膜层即为富含淋巴细胞的单个核细胞层。使用移液器小心吸取该层细胞,转移至新的离心管中,再通过适当的洗涤步骤去除残留的分离液和杂质,即可获得相对纯净的淋巴细胞。

  1. 存储条件:为保证 FICOLL PAQUE PLUS 的性能,应将其存储于 4 - 30℃的环境中 。避免阳光直射和高温环境,防止产品变质。在使用过程中,要注意产品的有效期,尽量在有效期内使用,以确保实验结果的可靠性。开封后的产品应尽快使用,并妥善保存剩余部分,防止微生物污染。若发现产品出现浑浊、沉淀或颜色异常等情况,请勿使用。

GE Life 的 FICOLL PAQUE PLUS 凭借其先进的技术原理、性能表现、广泛的应用范围以及相较于其他方法的显著优势,成为科研人员在淋巴细胞分离领域的得力工具 。无论是基础科研探索,还是临床应用研究,它都能为科研工作提供高质量的淋巴细胞样本,助力科研人员在生命科学领域不断取得新的突破。但需注意,本产品仅用于科研用途,不可用于临床诊断或治疗。在使用过程中,若遇到任何问题,可随时联系 GE Life 专业的技术支持团队获取帮助。


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