0.25%胰酶溶液(EDTA+酚红) 细胞传代实验标准化配置指南

胰蛋白酶（Trypsin）是一种丝氨酸水解酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切段，水解细胞间的蛋白质，破坏细胞间的连接，从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。胰酶分散细胞的活性与组织或细胞的特性、胰酶浓度、温度和作用时间有关，在pH 8.0和37℃时，胰酶的作用能力最-强，因此使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。

一般常用胰酶的工作浓度为0.25%，而半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用低浓度（0.05%）的胰酶进行细胞消化。由于EDTA能够螯合Ca2+和Mg2+，从而破坏细胞连接促进细胞的解离，因此在胰酶溶液中常常会加入一定量的EDTA混合使用，以增强解离效果。

0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚红，溶于PBS)信息

0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚红，溶于PBS)注意事项

1、由于不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样，因此操作人员应根据实际情况，确定最佳消化时间；消化细胞时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁和生长状况；

2、使用0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚红，溶于PBS)时应注意无菌操作，避免污染；

3、不宜长时间放置于室温环境或2-8℃长期保存；

4、2-8℃中解冻，摇匀后使用，切忌反复冻融，用量较少时建议分装冻存。

5、本产品仅用于科研或进一步研究使用，不用于诊断和治疗。

6、0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚红，溶于PBS)中含有酚红，由于是磷酸盐缓冲体系，在冷冻后会变成浅黄色。同时该产品采用干冰运输，因此在运输过程中包装内会有部分二氧化碳累积，这些二氧化碳可能会进入到溶液中导致pH略微下降。该种浅黄色的胰酶溶解后依然会变成橙红色液体可以正常使用，或者也可以采用无菌的2 M氢氧-化钠溶液对PH进行微调后使用。

0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚红，溶于PBS)文献列表

• Near-infrared light-responsive nanocomposite hydrogels loaded with epidermal growth factor for diabetic wound healing (2025-02-14)

  期刊：Materials Today Bio

  DOI：10.1016/j.mtbio.2025.101578

  影响因子 ：8.7

  引用产品： MEM 培养基 ,  特级胎牛血清 ,  青霉素-链霉素溶液（双抗），100× ,  0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA，溶于PBS）

• Phytic acid extraction from rice bran with acetic acid: Optimization, antioxidant capacity and mechanism based on cellular metabolomics (2025-01-22)

  期刊：LWT-FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY

  DOI：10.1016/j.lwt.2025.117394

  影响因子 ：6.0

  引用产品： Hep G2 细胞 ,  DMEM高糖 培养基 ,  0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA，溶于PBS） ,  青霉素-链霉素溶液（双抗），100×

0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA、酚红，溶于PBS)常见问题解答

Q：胰蛋白酶溶液在4度大概能放多久？

A：通常我们建议胰蛋白酶放置在4℃冰箱内一周内使用完毕为宜，如果您的使用量较少，可以将胰蛋白酶混匀后按需进行分装，用不完的放在-5~-20℃冰箱长期保存。