植物ELISA检测试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的抗原会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗体与结合在包被抗体上的抗原结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,抗原浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中指标的浓度。
生物样品中的通常以无活性的形式存在,在检测指标活性前必须进行活化处理。
活化方法如下:
血清、血浆:280μL标准品&样品稀释液中加入40μL样品,混匀,加入40μL活化试剂1,室温孵育10分钟。再加入40μL活化试剂2,混匀后立即检测。
注意:样品被稀释了10倍!
细胞培养上清:20μL标准品&样品稀释液中加入100μL样品,混匀,加入40μL活化试剂1,室温孵育10分钟。再加入40μL活化试剂2,混匀后立即检测。
注意:样品被稀释了2倍!
组织匀浆:1960μL标准品&样品稀释液中加入40μL样品,混匀后检测。
注意:样品被稀释了50倍!
免责声明
- 凡本网注明“来源:化工仪器网”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:化工仪器网”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
- 本网转载并注明自其他来源(非化工仪器网)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
- 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。