精品网站在线免费观看 浅谈油气田微生物含量检测技术

三种方法准确度对比

绝迹稀释法（MPN）

通过利用硫化物与培养基中的亚铁离子反应生成黑色的硫化亚铁，根据测试瓶变黑的数据和待测样品的稀释倍数，查询数目表来得到样品中的SRB细菌浓度。此方法在现场可及时进行细菌培养，避免因长时间而造成细菌滋生（死亡），从而导致细菌含量检测结果偏大（偏小）。对于以年为周期的长期监测工作，可通过此方法反应细菌变化趋势，分析微生物腐蚀风险的变化。但是对于现场施工以及杀菌剂的调整，该方法无法及时反应细菌情况。

图4 MPN法检测过程

酶联免疫法（ELISA）

通过高纯度抗体与SRB细菌中腺苷酰硫酸还原酶结合并产生蓝色响应，根据颜色的深浅对比比色卡读出SRB细菌含量。ELISA在现场应用时能迅速得到结果。但因现场环境特殊，尤其是海上平台，抗体的活性受到一定程度影响，采用ELISA测试结果误差较大。

图5 ELISA检测剂盒

凝集反应检测法(MAT)

通过细菌或者细胞等颗粒性抗原与抗体结合后，形成肉眼可见的凝集小块，可根据出现凝集现象的最高稀释倍数来计算。MAT同ELISA方法一样，在现场可快速检测出细菌含量，但因抗体受环境影响，且不易保存，同时受主观影响因素较大，测试结果有着一定误差使用频率不高。

图6 MAT法

实时荧光定量PCR法(QPCR)

通过标记细菌的遗传物质，检测其扩增产物的含量来确定SRB的含量。因该方法无需进行细菌培养，可有效避免细菌死亡造成的结果误差。可以实时反应现场细菌的情况。但是对于采出水而言，因杂质较多，DNA的提取较为困难，同时QPCR技术需要大型实验设备和严格的人员培训，且现场样品DNA的提取易受环境杂质等因素的干扰，因此更适合在有配套实验室的情况下使用。

图7 QPCR检测细菌