快速转膜液是一种高达20倍浓度的高效转膜液,用于WesternBlot湿转法转膜,能高效快速地将蛋白转移到印迹膜(PVDF或硝纤膜)上。不使用甲醇,能在15-30分钟内完成转膜过程。
产品特色:
1、高效安全:不使用甲醇,减少有毒试剂使用。
2、快速稳定:能在15-30分钟完成转膜过程,产热量小,减少蛋白损失。
3、兼容性好:兼容Laemmli胶,预制胶,FastPAGE,Bis-Tris胶等多种凝胶。
快速转膜液操作步骤:
1、1X快速转膜液的配制(1000ml):取50ml快速转膜液(20X)+850ml去离子水+100ml无水乙醇。
2、做好转印三明治结构,然后转移至电泳槽中,设定恒流400mA,电泳时间25-30分钟完成蛋白转膜。
快速转膜液使用要注意:
(1)PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒以上。
(2)转印电流建议设定恒流400mA,一般25-30分钟可以将150kD以下蛋白可以转印;小于100kD蛋白20分钟即可可以转印;对于大于150kD蛋白,建议延长5-10分钟。
(3)凝胶的浓度影响转印的效率,对于胶浓度7.5%,20分钟即可完成转印;对于胶浓度10%,25-30分钟即可完成转印;对于胶浓度大于10%,建议延长5-10分钟
(4)40分钟时间内转膜不需要放冰上,转膜槽内外都不可放冰预冷,否则会影响效率。
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