血液中乙醇浓度的气相色谱分析

过量饮酒已经成为世界公共卫生的主要问题，目前我国对饮酒量检测主要通过检测血液中的乙醇浓度。

血液中乙醇浓度的测定有化学法、传感器法、酶法和气相色谱法等，其中气相色谱法是目前使用较普遍的方法。本文利用乙醇的易挥发性，以叔丁醇为内标，用顶空自动进样气相色谱，火焰离子化检测器进行检测，建立的方法样品用量少，操作简便，准确度高，能对血液中的乙醇进行可靠分析。

１设备

气相色谱仪：天津兰博GC6500气相色谱仪，配FID检测器，顶空自动进样器。

2 试剂

乙醇，叔丁醇均为色谱纯。

3 分析步骤

3.1 标准曲线的绘制

　用移液枪分别取0.10 ml配制成不同浓度的乙醇标准溶液（0.10 mg/ml、0.20 mg/ml、0.50 mg/ml、1.00 mg/ml、2.00 mg/ml、3.00 mg/ml)加入预先加有0.50 ml叔丁醇内标工作液（浓度为0.04 mg/ml)的顶空自动进样器样品瓶内，用封盖器盖上带有硅橡胶垫的顶空钳口盖，混匀，置于顶空自动进样器中加热后测定。以乙醇浓度为横坐标，乙醇对叔丁醇的峰面积比为纵坐标，绘制标准曲线。

3.2 样品分析

用移液枪移取0.10 mL待测血液样品于预先加有0.50 ml叔丁醇内标工作液（浓度为 0.04 mg/ml)的顶空自动进样器样品瓶内，用封盖器盖上带有硅橡胶垫的顶空钳口盖，混匀，置于顶空自动进样器中加热后测定。

3.3色谱条件

色谱柱：GDX-102（60目～80目）填充色谱柱(2 m × 3 mm)；

载气：高纯氮气，流速20.0 ml/min；

氢气：30 ml/min；空气：300 ml/min；尾吹气：28 ml/min；

进样器温度：150℃；检测器温度：250℃；

柱温：70℃；

进样量：1.0 ml，分流比：5:1；

顶空条件：样品瓶温度70℃，平衡时间15 min，进样阀温度：105℃，管路温度110℃。

3.4结果与讨论

在规定的色谱条件下进样，以乙醇浓度为横坐标，对应的峰面积为纵坐标，绘制工作曲线。建立的标准曲线为y=1.7092x+0.0468，r＝0.998。标准品色谱图如图1所示。

图1 乙醇和叔丁醇色谱图

空白血中分别加入不同量的乙醇后制成不同浓度的三份样品，以上面的条件每份样品重复测定6次，平均回收率在97.8% ～104.3%之间，RSD在2.0%以下，结果见表1。

表1 回收率与精密度试验结果（n=6）

4结论

　　本文建立的自动顶空气相色谱法测定血液中的乙醇方法，操作简便，准确度高，能满足血液中乙醇含量的检验要求，自动化程度高，分析时间短，适合批量样品检验需求。