以下是关于 生物素标记依帕司他（Biotin - Epalrestat） 的详细介绍，内容涵盖基本信息、制备方法、特性优势及应用领域等方面：
生物素（Biotin）：
又称维生素 H 或辅酶 R，是一种小分子水溶性维生素，其分子结构中的咪唑酮环可与亲和素（Avidin）或链霉亲和素（Streptavidin）以 ** 高亲和力（Kd≈10⁻¹⁵ M）** 特异性结合，常用于生物分子的标记与检测。
依帕司他（Epalrestat）：
是一种醛糖还原酶抑制剂（ARI），化学名为 N - (1,3 - 二噻烷 - 2 - 基甲基) - 5 - 甲基 - 2 - 苯基呋喃 - 3 - 甲酰胺，分子式为 C15H15NO2S2，分子量为 303.42。
生物素标记依帕司他：
通过化学偶联技术将生物素分子连接到依帕司他的特定官能团（如氨基、巯基等）上，形成具有靶向识别能力的标记化合物。
选择合适的生物素活化试剂，例如：
生物素 - N - 羟基琥珀酰亚胺酯（Biotin - NHS）：适用于与依帕司他分子中的氨基（−NH2）反应。
生物素 - 马来酰亚胺（Biotin - Maleimide）：适用于与巯基（−SH）反应（若依帕司他结构中含巯基或经修饰引入巯基）。
活化条件：将生物素衍生物溶于有机溶剂（如 DMSO、DMF），加入碱（如 DIPEA）调节 pH 至弱碱性（pH 7.5 - 9.0），促进活化反应。
将活化后的生物素衍生物与依帕司他在室温或温和加热条件下混合，通过官能团的共价结合形成稳定产物。例如：
生物素与亲和素 / 链霉亲和素的结合具有强稳定性，可通过荧光标记、酶标记（如 HRP）或同位素标记的亲和素实现信号放大，适用于微量样品的检测（如 ELISA、免疫荧光等）。
合理设计标记位点（如选择非活性位点连接生物素）可避免影响依帕司他的醛糖还原酶抑制功能，使其在标记后仍能参与生物靶点的相互作用，适用于药代动力学研究（如体内分布、代谢途径追踪）。
生物素 - 亲和素系统（BAS）已广泛应用于生物技术领域，配套试剂（如亲和素磁珠、亲和素包被板）成熟，便于实验流程标准化。
依帕司他的醛糖还原酶抑制活性可通过生物素标记技术进行高通量筛选。例如，将生物素标记的底物（如葡萄糖）与酶共孵育，通过亲和素捕获反应产物，定量评估依帕司他对酶活性的抑制程度。
标记位点选择：需避免生物素连接至依帕司他的活性中心（如与醛糖还原酶结合的关键基团），可通过分子对接模拟预测最佳标记位置。
溶剂兼容性：依帕司他水溶性较差，反应体系中需加入适量有机溶剂（如 DMSO）助溶，但需控制浓度以避免蛋白变性或细胞毒性。
稳定性验证：标记物需在生理条件（pH 7.4、37℃）下验证稳定性，避免生物素 - 连接键过早断裂导致信号丢失。
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