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天津益元利康生物科技有限...

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Zymo甲基化试剂盒核心优势与应用指南

阅读:138      发布时间:2025-5-28
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一、Zymo甲基化试剂盒核心技术特点

1. 高效亚硫酸盐转化

   -转化率>99%:采用优化的亚硫酸盐处理体系(如EZ DNA Methylation-Gold™),确保未甲基化胞嘧啶全部转化为尿嘧啶,甲基化位点保留完整。  

   - 快速处理:全程仅需3小时(Lightning系列)至6小时(Gold系列),比传统方法缩短50%时间。  

2. 广泛样本兼容性  

   - DNA类型:适用于基因组DNA≥50 pg)、FFPE样本(需预修复)、cfDNA≥1 ng)。  

   - 污染物耐受:可处理含10% SDS1%血红蛋白的样本(需配合Zymo Clean & Concentrator纯化)。  

3. 高灵敏度与重复性  

   - 检测下限:甲基化频率 0.1%(如用于肿瘤早筛的ctDNA检测)。  

   - 批间差异:CV <5%(基于NIST标准品验证)。 

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二、Zymo甲基化试剂盒与主流产品线对比

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三、Zymo甲基化试剂盒典型应用场景

1. 肿瘤表观遗传研究  

   - 早筛标志物验证:检测ctDNASEPT9SHOX2 等基因甲基化(灵敏度95%)。  

   - 甲基化分型:基于850K芯片数据构建TCGA样甲基化亚型(如胶质瘤IDH1突变关联)。  

2. 发育生物学  

   - 单细胞甲基化分析:配合Zymo PicoMethyl™ 试剂盒,处理单细胞DNA(适用于10-100个细胞)。  

3. 植物表观遗传学  

   - 环境胁迫响应:检测 CpG岛 和 CHH位点 甲基化动态(需配合BS-Seq分析)。  

四、Zymo甲基化试剂盒操作流程优化建议

1. DNA质量控制  

   - 使用Nanodrop检测A260/A2801.8-2.0),A260/A230 >1.8。  

   - FFPE样本需先进行 脱蜡修复(推荐Zymo FFPE DNA Kit)。  

2. 转化条件优化  

   - 高温变性步骤:98℃ 8分钟(Gold系列)→ 95℃ 30秒(Lightning系列)。  

   - 转化后纯化:使用Zymo-Spin IC Column去除亚硫酸盐残留(回收率>90%)。  

3. 下游兼容性  

   - PCR扩增:推荐使用ZymoTaq™ PreMix(抗尿嘧啶干扰,扩增效率提升30%)。  

   - NGS建库:配合Methyl-Seq Library KitUMI标记,降低扩增偏差)。  

五、Zymo甲基化试剂盒与竞品性能对比

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Zymo甲基化试剂盒用户反馈与解决方案

- 常见问题:  

  1. 转化后DNA片段化 缩短变性时间至5分钟,使用低熔点琼脂糖包埋。  

  2. PCR扩增失败 增加2-4个热启动循环(98℃ 10→60℃ 30秒)。  

  3. 批次间差异 使用同一批次转化柱,避免不同温度环境操作。  

- 技术支持:提供 免费实验方案优化服务(48小时内响应)。  

总结

Zymo甲基化试剂盒在转化效率、速度、小样本兼容性 方面表现很好,尤其适合肿瘤液体活检和单细胞表观遗传研究。

欢迎联系Zymo代理——天津益元利康生物科技有限公司咨询选购!

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