液相色谱系统是一种在化学、生物、医药等诸多领域广泛应用的重要分析工具，它主要由多个关键部分协同工作来实现对混合物中各成分的分离与分析，其核心原理基于样品中不同组分在固定相和流动相之间的分配差异。当流动相携带样品通过装有固定相的色谱柱时，各组分与固定相和流动相的作用力不同，导致它们在柱中的迁移速度不同，从而实现分离。
 

　　液相色谱系统各流程之间的校准方法：
 

　　1.流速校准：
 

　　-称重法：在一定的流速设置下，准确收集一段时间内流出的流动相，通过称重计算实际流速。例如，以甲醇为流动相，按设定流量，待流速稳定后，在流动相排出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确地收集10 -25分钟，称重后根据流动相的密度计算实际流速，与设定流速进行比较，偏差应在允许范围内。
 

　　-仪器自带校准功能：许多现代液相色谱仪具有自带的流速校准程序，可按照仪器操作手册中的说明进行操作，仪器会自动对流速进行校准和调整。
 

　　2.检测器校准：
 

　　-波长校准(针对紫外 -可见检测器等)：使用合适的波长校准标准品，如钬玻璃滤光片等，调整检测器的波长，使其与标准品的特征吸收波长相符，以确保检测器在不同波长下的准确性。
 

　　-灵敏度校准：使用标准液进样，设置合理的流速和检测器参数，调整检测器增益，逐渐增大信号幅度，记录增益值，并与仪器规格进行比较。
 

　　3.进样器校准：
 

　　-对于手动进样器，可使用微量注射器抽取已知体积的标准溶液，多次进样，根据进样后色谱峰的响应值计算实际进样量，与理论进样量进行比较，评估进样器的准确性和重复性。
 

　　-对于自动进样器，可通过设置不同的进样量，连续多次进样，检查进样量的准确度和精密度是否符合要求。同时，检查进样器的进样顺序、交叉污染等情况。
 

　　4.保留时间校准：
 

　　-使用含有多种组分的标准品溶液，通过比较标准品中各组分在液相色谱图上的保留时间，对仪器进行校准。可在相同的色谱条件下，定期进样标准品溶液，观察保留时间的变化情况，若超出允许范围，则需要进行调整。