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生物样品活化方法
2025-4-14 阅读(368)
植物ELISA检测试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的抗原会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗体与结合在包被抗体上的抗原结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，抗原浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中指标的浓度。
生物样品中的通常以无活性的形式存在，在检测指标活性前必须进行活化处理。
活化方法如下：
血清、血浆：280μL标准品&样品稀释液中加入40μL样品，混匀，加入40μL活化试剂1，室温孵育10分钟。再加入40μL活化试剂2，混匀后立即检测。
注意：样品被稀释了10倍！
细胞培养上清：20μL标准品&样品稀释液中加入100μL样品，混匀，加入40μL活化试剂1，室温孵育10分钟。再加入40μL活化试剂2，混匀后立即检测。
注意：样品被稀释了2倍！
组织匀浆：1960μL标准品&样品稀释液中加入40μL样品，混匀后检测。
注意：样品被稀释了50倍！
