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细胞培养的相关知识分享
时间：2022-11-30
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细胞培养技术又称单细胞分离培养技术，即在体外将一个细胞从细胞群中分离出来，使其能够复制成一个新的细胞群培养体系。由单个细胞形成的细胞群称为克隆，纯化后的细胞群称为细胞系，即细胞培养。
各细胞的遗传和生物学特性非常相似和一致，有利于不同细胞群形态和功能的比较研究。
菌落(克隆)计数：在倒置显微镜下观察、计数直径大于75μm或含有50个以上细胞的克隆。
血细胞计数板细胞数/ml=4个大正方形细胞总数/4×104
细胞计数器/细胞分析仪(凯西，德国)
细胞活力0.4%台盼蓝染色
MTT法可用于评价细胞的相对数量和活性
细胞的冷冻保存和复苏：
低温保存：4℃缓慢冷冻60分钟(可延长)
-20℃下40-60分钟(不能太长，可以跳过*)
-80℃(半年内转液氮/过夜)程控冷却仪表1-3℃/min转液氮
复苏：38℃溶解，注意水面不能接触冻存管盖边
上清液以低速(500转/分)离心除去，加入相同的培养基，轻轻吹扫上清液，接种于适当大小的培养瓶中。