SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT 试剂盒是一个完整的细胞裂解物系统,可直接根据培养细胞进行基因表达分析,而无需 RNA 纯化步骤。SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT 细胞裂解试剂提供了最高灵敏度的 Cells-to-CT Fast Advanced 逆转录酶混合物、2X RT 缓冲液和 PowerUp SYBR Green预混液。SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT 试剂盒可在现有最快的工作流程中为您提供您所需的灵敏度:在约1.5小时内从整个细胞板中获得基因表达分析结果。
•全面—优化的工作流程包括移除 gDNA 的细胞裂解试剂、新型 Fast Advanced RT 酶混合物、缓冲液和新型 PowerUp SYBR Green Fast Advanced 预混液
•快速—7分钟样品制备,包括在室温下进行 DNase处理
•简便—可以在试管或直接在培养板中裂解样品
•稳健—可以对每个样品10–100,000个细胞进行基因表达分析;结果与从纯化 RNA 中获得的等效
•高效—含有足够的试剂以从100起始样品中生成1000实时荧光定量 PCR 结果
无需从培养细胞中分离 RNA 的方法
Cells-to-Ct 方法具有裂解试剂,可裂解细胞并保护 RNA。5在分钟裂解步骤中同时去除 DNA,可节省时间并提高易用性。然后通过加入“终止液停止裂解,"该终止液会不可逆地与裂解试剂结合。
SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT 试剂盒含有用于 cDNA 合成的 Cells-to-Ct Fast Advanced 逆转录 (RT) 试剂和用于实时荧光定量 PCR 分析的 PowerUp SYBR Green预混液。引物对由用户提供。
简单7-分钟的样品制备
SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT 试剂10–盒专门设计用于100,000个培养细胞/样品。细胞先用 PBS 清洗,再于室温下置于裂解液中裂解5分钟;同时进行 DNase 处理。裂解过程在加入终止液,室温孵育 2 分钟后终止。裂解液现可直接进行逆转录或在–20°C条件下短期储存,或在-80C
条件下长期储存。较高的检测灵敏度
不同于某些将 RT 反应中裂解物的量限制在10%的竞品试剂盒,SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT 试剂盒可以容纳总 RT 反应体积45%的细胞溶解产物。此外,cDNA 至多可占实时荧光定量 PCR 反应体积的30%。在优化的 RT 反应中加入大量裂解物,以及后续使用 PowerUP SYBR Green 预混液进行实时荧光定量 PCR 反应的大量 cDNA ,可较大限度提高灵敏度。该预混液可精确而准确地对靶标进行扩增,从而能够检测少量靶标,如低表达水平的转录物。。
减少样品损失和转移错误
由于可直接在培养孔(96或384孔)中处理样品,故样品处理和样品损失或转移错误的可能性被降至较低,从而有益于快速、高通量的处理。与传统的多步骤 RNA 分离方案不同,无需加热、清洗或离心。该试剂盒大大简化了耗时费力的30–60流程,将其缩短至7分钟。
经过验证的性能
SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT 试剂盒的所有组分均经过优化,具有一致性且可靠的性能。这样可以消除参与不同样品制备、RT 和实时荧光定量 PCR 试剂盒工作过程中的猜测,使您在现有的较快样品至结果工作流程中获得所需的灵敏度。
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