在体内,基底膜是以细胞为基础的薄层细胞外基质。基质胶是一种可溶性的基底膜制剂,这种基质是从Engelbreth-HolmSwarm(EHS)小鼠肉瘤,一种富含细胞外基质蛋白的肿瘤中抽提出来的。它的主要成分是层粘连蛋白,接着是胶原蛋白Ⅳ、硫酸乙酰肝素蛋白多糖和巢蛋白。基质胶也含有转化生长因子β、 表皮生长因子、类胰岛素生长因子、成纤维细胞生长因子、组织纤溶酶原激活物和在EHS肿瘤中自然出现的其他生长因子。基质胶对正常和变换的锚定依赖型上皮样细胞和其他细胞类型的附着和分化是有效的。这些细胞类型包括神经元肝细胞支持细胞小鸡晶状体上皮细胞和血管内皮细 胞。在成年大鼠肝细胞血管内皮细胞以及小鼠和人乳腺上皮细胞的三维细胞培养中,基质胶会影响基因 的表达。这是几种类型肿瘤细胞侵袭实验的基础,支持体内末梢神经再生,并提供体外和体内血管再生研究的必需底物。基质胶也支持免疫抑制小鼠中体内人类肿瘤的增殖。基质胶能用于未分选乳腺细胞的移植以及分选的上皮细胞亚群嵌入基质胶。这一基质也被作为癌症干细胞模型并被证明能在体内增强肿瘤生长速率。
基质胶的主要成分:
1. 层粘连蛋白(Laminin):这是基质胶中含量最高的成分,是一种主要的基底膜糖蛋白,具有促进细胞黏附、迁移和分化的功能。
2. IV型胶原(Collagen IV):这是另一种主要的结构蛋白,有助于形成基底膜的支架。
3. 巢蛋白(Nidogen/Entactin):这是一种连接蛋白,能够将层粘连蛋白和IV型胶原连接起来,增强基底膜的稳定性。
4. 硫酸肝素蛋白多糖(Heparan Sulfate Proteoglycans, HSPGs):如Perlecan,具有结合生长因子和调节细胞行为的功能。
5. 生长因子:基质胶中含有多种生长因子,如表皮生长因子(EGF)、转化生长因子β(TGF-β)、胰岛素样生长因子(IGF)和成纤维细胞生长因子(FGF)等,这些因子能够影响细胞的生长、分化和血管生成。
6. 其他成分:还包括一些其他ECM蛋白、酶和生长因子结合蛋白等。
基质胶种类
主要有常规标准型(Standard)、高浓度(HC)、无酚红(Phenol red-free)、生长因子减量型(Growth factor reduced, GFR)和人胚胎干细胞专用(hESC-qualified)几个类别。
⚫ 标准型基质胶:浓度范围大致为 8-12mg/ml
⚫ 高浓度基质胶:浓度范围大致为 18-22mg/ml
⚫ 无酚红基质胶:不含酚红,产品融化后颜色透明
⚫ 生长因子减量型基质胶:基质胶里包含的生长因子经过减量处理
⚫ 人胚胎干细胞专用基质胶:经过对 hESC 培养的测试,可以用于人胚胎干细胞的培养
基质胶的主要用途:
1.细胞培养:作为三维(3D)细胞培养的支架,模拟体内细胞外基质环境,促进细胞的生长、分化和形态发生。
2.血管生成研究:用于体外或体内血管生成实验,评估血管生成抑制剂或促进剂的效果。
3.肿瘤研究:用于研究肿瘤细胞的侵袭、转移和血管生成。
4.干细胞研究:用于干细胞的培养和分化,模拟干细胞微环境。
使用注意事项:
1.温度敏感性:基质胶在4°C时呈液态,在室温或37°C时会迅速凝结成凝胶状。因此,在操作过程中需要保持低温。
2.无菌操作:为了避免污染,所有操作需要在无菌条件下进行。
3.生长因子含量:基质胶中含有多种生长因子,可能会影响实验结果,因此需要根据实验目的选择合适的基质胶类型。
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