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108次以下是关于人凋亡蛋白酶激活因子1(ICAD)ELISA试剂盒的实验使用说明综合整理:
BS-0223 人凋亡蛋白酶激活因子1(ICAD)ELISA试剂盒
一、实验原理
采用双抗体夹心法(ABC-ELISA法)检测样本中ICAD浓度。通过标准品与样本OD值的比例关系计算浓度。
二、试剂盒组成
标准品:400ng/ml或2700ng/L(需用稀释液复溶)
酶标包被板:96孔或48孔配置
显色剂:底物A/B液
洗涤液:20×浓缩液需1:20稀释
终止液:用于终止反应
三、操作步骤
样本准备
血清/血浆:离心后取上清,避免反复冻融。
组织匀浆:需充分混匀。
标准品复溶
冻干标准品加0.5ml稀释液,静置10分钟溶解。
加样与温育
标准品孔加50μL不同浓度标准品,样本孔加10μL样本+40μL稀释液。
每孔加入HRP标记抗体100μL,37℃孵育60分钟。
洗涤
用洗涤液洗板5次,拍干。
显色与终止
加底物A/B各50μL,37℃避光孵育15分钟。
加终止液50μL,15分钟内测450nm OD值。
四、注意事项
保存条件:试剂盒2-8℃保存,使用前室温平衡20分钟。
质量控制:建议标准品和样本做双份检测。
干扰因素:避免细菌污染或反复冻融。
五、结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线,通过回归方程计算样本浓度。
如需具体试剂盒的完整说明书,可参考厂商提供的详细文档,以上资料仅供参考。
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