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小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒实验使用说明书

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  以下是关于小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒的实验使用说明综合指南:

  BS-2016  小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒

  一、试剂盒组成‌

  预包被酶标板‌:96孔或48孔规格,含抗小鼠CXCR3单抗

  标准品‌:通常为80ng/瓶或240ng/L浓度,提供2-5瓶

  检测试剂‌:

  酶标抗体工作液(HRP标记)

  显色液(TMB A/B液)

  终止液(硫酸溶液)

  辅助溶液‌:

  10×标本稀释液、20×浓缩洗涤液

  封板膜、密封袋等耗材

  二、样本处理‌

  样本类型‌:血清、血浆、细胞上清液或组织匀浆

  处理方法‌:

  血清/血浆‌:1000-3000×g离心10-30分钟,去除颗粒或纤维蛋白

  细胞上清‌:离心去除细胞碎片

  组织匀浆‌:生理盐水匀浆后离心取上清

  保存条件‌:-20℃分装冻存,避免反复冻融

  三、实验步骤‌(双抗体夹心法)

  标准品稀释‌:用标准品稀释液配制梯度浓度(如0-400 ng/L)

  加样‌:

  每孔加入100μL标准品或样本,37℃孵育1-2小时

  洗涤‌:甩干孔内液体,加满洗涤液静置30秒,重复3-5次

  加酶标抗体‌:每孔加入100μL HRP标记抗体,37℃孵育30-60分钟

  显色‌:加入TMB底物避光反应15-30分钟

  终止与检测‌:

  加终止液(50μL/孔)后立即测定450nm OD值

  根据标准曲线计算样本浓度

  四、注意事项‌

  温度控制‌:

  试剂使用前需室温平衡20分钟,避免低温影响灵敏度

  显色反应需严格避光

  操作规范‌:

  避免孔间交叉污染,使用独立枪头

  边缘孔易出现“边缘效应",建议弃用外周孔

  数据有效性‌:

  标准曲线R²应≥0.99,复孔CV值<15%

  五、常见问题‌

  灵敏度下降‌:可能因试剂未恢复至室温或超过有效期

  背景过高‌:洗涤不或样本溶血导致

  如需完整说明书或技术支持,建议联系厂商获取最新版本。

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