产品简介
详细介绍
口蹄疫病毒O型检测试剂盒
产品名称】
通用名称:口蹄疫病毒O型检测试剂盒(实时荧光PCR法)
英文名称:Foot and Mouth Disease Virus(serotype O)Detection Kit (Real-Time PCR Method)
【包装规格】 25T/盒 & 50T/盒
【预期用途】
口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,FMDV) 属于小RNA病毒科,口蹄疫病毒属,主要侵害偶蹄兽,有O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和Asia-I七个血清型。口蹄疫发病以发热、口腔黏膜及蹄部和乳房皮肤发生水泡和溃烂为特征,是兽疫局规定的A类传染病,易通过空气传播,传染性强,流行迅速,偶尔感染人。由于口蹄疫传播迅速、难于防治、补救措施少,被称为畜牧业的“*杀手”。
本试剂盒利用实时荧光PCR原理,定性检测口蹄疫O型病毒(FMDV-O),对FMDV-O引起的偶蹄兽类病的诊断和监控具有重要指导意义。
【检验原理】
本试剂盒针对口蹄疫病毒O型的高度保守区域设计特异性引物和探针,在反应体系中含口蹄疫病毒O型基因组模板的情况下,PCR反应得以进行并释放荧光信号。利用荧光定量PCR仪对PCR过程中相应通道信号进行实时监测和输出,实现检测结果的定性分析。
【主要组成成份】
序号 | 组成 | 25T/盒 | 50T/盒 |
1 | FMDV-O RT-PCR反应液 | 375 μL×1管 | 750 μL×1管 |
2 | FMDV-O逆转录酶 | 50 μL×1管 | 100 μL×1管 |
3 | FMDV-O Taq酶 | 75 μL×1管 | 150 μL×1管 |
4 | FMDV-O阳性对照 | 40 μL×1管 | 40 μL×1管 |
5 | FMDV-O阴性对照 | 40 μL×1管 | 40 μL×1管 |
6 | 说明书 | 1份 | 1份 |
注:阴性对照为偶蹄兽类基因组DNA,阳性对照为失去活性的FMDV-O病毒cDNA。
【储存条件及有效期】避光-20℃以下保存,避免反复冻融,有效期12个月。
【适用仪器】ABI 系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列 、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列、杭州博日系列等多通道实时荧光定量PCR仪。
【样本要求】
新鲜采集的咽拭子、疱疹液和粪便标本,并使用灭菌生理盐水悬浮。
2.应避免标本间交叉污染。
3.标本收集后可立即检测;若不能立即检测,可置于2~8℃冷藏过夜保存;如需长期保存,标本应冻存于-80℃以下,避免反复冻融。
【检验方法】
1. 试剂准备(试剂准备区)
(1)从冰箱中取出试剂盒, 从试剂盒中取出实验所需试剂,充分融化混匀并瞬时离心以去除管壁附着液体。
(2)核算当次实验所需要的反应数(n),并根据如下表所示反应体系计算当次实验所需要的各种试剂量。
n =阴性对照数(1T)+阳性对照数(1T)+误差预留量(1T)+样本数
单反液配制表(每份) | RT-PCR反应液 | 15.0 μL |
逆转录酶 | 2.0 μL | |
Taq酶 | 3.0 μL |
(3)在无菌离心管中加入上述试剂,充分混匀后瞬时离心。按照20 μL/管分装量将试剂分装至PCR反应管。
2.样本准备(样本处理区)