在生物技术领域,耐药细胞株的研究对于揭示肿瘤耐药机制、开发新型治疗策略具有重要意义。本文将分享由精品视频一区二区三区 上海淳麦生物科技有限公司提供的“人结肠癌耐奥沙利铂耐药株HCT-116+Oxaliplatin"的应用案例,从技术方案、实验案例和产品应用三个维度进行阐述,并结合相关文献数据,增强产品的真实性和科学性。
一、技术方案
1. 耐药细胞株的构建
人结肠癌耐奥沙利铂耐药株HCT-116+Oxaliplatin是通过药物浓度梯度递增诱导法构建的。具体步骤如下:
以人结肠癌细胞HCT-116为亲本细胞,调整细胞密度为2×10^5/ml,加入终浓度为0.1 μg/ml的奥沙利铂(L-OHP)培养液,连续作用48小。
弃去上清液,加入不含L-OHP的新鲜培养液继续培养,待细胞恢复正常生长后,进行消化传代。
逐步提高L-OHP的浓度,分别按0.4、0.8、1.6、3.2、6.4、12.5 μg/ml浓度倍增,最终获得耐药细胞株HCT-116/L-OHP,并维持培养在含2 μg/ml的L-OHP培养液。
2. 耐药机制研究
通过CCK-8法检测耐药细胞株的半数抑制浓度(IC50),结果显示HCT-116/L-OHP对L-OHP的耐药指数为10.。此外,耐药细胞中UGCG、MDR1 mRNA及其编码的P-糖蛋白(P-gp)表达显著增加,表明UGCG通过调控MDR1/P-gp的表达参与了耐药机制的形成二、实验案例
1. 耐药细胞株的鉴定
实验中,HCT-116/L-OHP细胞对L-OHP的耐药指数显著高于亲本细胞,且与顺铂(DDP)存在一定程度的交叉耐药,耐药指数为4.61,但对5-氟尿嘧啶(5-Fu)无交叉耐。这一结果为耐药细胞株的鉴定提供了重要依据。
2. UGCG基因的调控作用
通过UGCG siRNA转染HCT-116/L-OHP细胞,发现UGCG基因和蛋白表达被成功抑制,同时MDR1 mRNA和P-gp蛋白表达也显著降。这进一步证实了UGCG在耐药机制中的关键作用,并为后续的药物干预提供了理论基础。
三、产品应用
1. 肿瘤耐药机制研究
该耐药细胞株可用于深入研究结肠癌耐药机制,特别是UGCG和MDR1/P-gp通路在耐药中的作用。相关研究已表明,UGCG基因的高表达与耐药性密切相。
2. 药物筛选与开发
HCT-116/L-OHP细胞株可用于筛选针对耐药细胞的新型药物,特别是针对UGCG和MDR1/P-gp通路的抑制剂。通过药物干预实验,可评估新药的疗效和机。
3. 临床应用前景
该耐药细胞株的研究成果为临床治疗提供了新的思路。例如,通过联合应用UGCG抑制剂和传统化疗药物,有望克服耐药性,提高治疗效。
四、相关文献引用
本文引用了张秀芬等人的研,该研究详细描述了人结肠癌耐奥沙利铂耐药株HCT-116/L-OHP的构建过程及其耐药机制,为本产品的技术方案和应用案例提供了坚实的科学依据。
通过以上案例分享,我们展示了“人结肠癌耐奥沙利铂耐药株HCT-116+Oxaliplatin"的技术优势和应用前景。精品视频一区二区三区 上海淳麦生物科技有限公司将继续致力于提供高质量的生物技术产品,助力科研和临床研究的发展。