菌种保藏（culture preservation，culture collection） 是保持微生物菌株活力和遗传性状的关键技术。在分子生物学研究中，经过基因编辑或改造的菌种通常非常珍贵且微量，因此需要进行妥善的保藏。以下是具体的操作步骤：

菌种保藏 ：

1. 将待保存的菌液与配好的甘油混合液按 1:1 比例混合，最终达到 20% 甘油浓度。配置 40% （ v/v ）甘油灭菌水混合液。

2. 取 2ml 离心管或保菌管，加入 500 微升 40% 甘油 - 水混合液。

3. 用移液枪吸取 500 微升菌液，将枪头深入液面以下缓缓加入。

4. 将离心管或保菌管放入 -80 ℃冰箱保存。

5. 在保菌管上标明日期、菌种、抗性等详细信息，以便日后识别。

菌液复苏 ：

1. 复苏保存的菌液可以进行后续操作。主要步骤如下：

2. 取含有抗性的 LB 培养基，每个培养管装入约八毫升。所有操作均在无菌操作台进行，以防污染。

3. 向每管加入 100 微升菌液， 37 ℃、 180rpm 摇 12 小时。

4. 氨苄抗性配置： 1g 氨苄青霉素钠溶解于 10ml 灭菌水中，过滤后 -20 ℃保存。

5. LB 培养基配置： 10g 氯化钠、 10g 胰蛋白胨、 5g 酵母提取物溶于一升体系中，分装到 250ml 锥形瓶，每瓶 100ml 。 Amp 抗性： 100ml 培养基加入 100 微升氨苄抗性。

通过这些简单的步骤，你可以有效地保藏和复苏珍贵的菌种，为后续的分子生物学研究提供坚实的基础。