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对于重组人GDF3检测流程你是否清楚
2022-1-20 阅读(394)
重组人GDF3试剂盒具有的三种特性：
灵敏度：最小的GDF-3 检测浓度小于30pg/ml。特异性：可同时检测重组或天然的人GDF-3。不与人其它细胞因子有交叉反应。重复性：板内、板见变异系数均小于10％。
重组人GDF3其要求有哪些：
1. 生物活性：进行相应的体外或体内活性检测。
2. 纯度：应用两种方法分析产品纯度。
3. 真实性：重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析；必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。
4. 内毒素：kinetic LAL法检测内毒素。
5. 蛋白含量：通过紫外光谱分析，电泳检测；必要时应用HPLC定量标准蛋白溶液。
6. 微生物：重组蛋白在装瓶之前都经过滤除菌处理。
重组人GDF3检测流程：
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul，置37 ℃暗处反应15分钟。
8. 每孔加入100ul终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。
