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重组蛋白真核表达与原核表达如何选择
2020-11-9 阅读(1631)
重组蛋白真核表达包括酵母表达系统、杆状病毒-昆虫细胞表达系统、腺病毒表达系统等。一般可以正确折叠，包含各种修改。但是价格高，周期长。
重组蛋白真核表达与原核表达如何选择
真核表达：常用酵母、昆虫、动物和哺乳动物细胞。其优点是根据原核生物蛋白与靶DNA的高度特异性相互作用而设计，不存在基因的非特异性激活或抑制。它可以诱导高达105倍的高效基因表达。可以严格控制基因表达。
原核表达：它的优点是可以在短时间内获得基因表达产物，而且成本相对较低。方法也简单，可以表达的蛋白质也很多。但缺点是表达的蛋白质没有经过修饰，不一定具有天然活性，表达系统不能调节表达时间和表达水平。一些基因的持续表达会对宿主细胞产生毒性作用，过度表达可能导致非生理反应。目前，蛋白质往往以包涵体的形式表达，这也导致了产品纯化的困难。可用于抗体制备或检测，但应避免功能试验。
目前的表达系统各有利弊，但一般理想的表达系统满足以下几点：一是特异性，不受其他内源性因素影响，只能通过外源性无毒物激活。二是不干扰，不干扰细胞通路。以及诱导剂的诱导性、生物利用度、可塑性和剂量依赖性。
因此，在选择表达系统时，必须充分考虑各种因素，如蛋白质性质、实验条件、生产成本、表达水平和安全性。权衡利弊后，选择相应的表达系统。
