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【实验室技能】细胞冻存全攻略:让你的细胞“休眠”更安心!
2025-3-6 阅读(169)
亲爱的科研小伙伴们,是否经常为细胞状态不稳定而焦虑?是否担心辛苦培养的细胞因意外污染全军覆没?今天带您解锁科研界的"细胞时光机"——超详细细胞冻存指南,文末更有冻存失败的6大避坑指南!
为什么说冻存是细胞房的头等大事?
✅ 建立珍贵细胞株的"备份保险箱"
✅ 避免连续传代导致的遗传漂变
✅ 应对实验室突发停电的预案
✅ 课题交接时最硬核的"学术遗产"
教科书级冻存操作七步曲
1️⃣ 【黄金时刻】选择对数生长期细胞
(Tips:融合度80-90%时为最佳窗口期)
2️⃣ 预冷冻存液:含10%DMSO的胎牛血清
3️⃣ 细胞消化后悬液离心(1000rpm,5min)
4️⃣ 冻存液轻柔重悬(浓度建议:5×10⁶/mL)
5️⃣ 分装冻存管(切记标注:细胞名称/代数/日期/操作者)
6️⃣ 程序性降温:4℃→-20℃→-80℃梯度冷冻
7️⃣ 最终归宿:液氮罐气相层(-196℃长期保存)
90%新手不知道的冻存黑科技
❗ 冻存管要用内部螺纹款(防液氮渗漏)
❗ 梯度降温神器:异丙醇冷冻盒比传统酒精灯更安全
❗ 复苏后存活率检测:台盼蓝染色+双荧光活死细胞检测
❗ 重要细胞株的"三重备份原则"(不同冻存批次+不同液氮罐)
冻存失败的六大"隐形杀手"
⚠️警报!冻存管从-80℃取出时冒白霜(冰晶形成警报)
⚠️ DMSO未提前预冷导致放热损伤
⚠️ 复苏时水浴温度超过40℃(37℃才是黄金温度)
⚠️ 未使用细胞专用冻存管(普通EP管会爆裂)
⚠️ 液氮罐未定期补充液氮(气相保存≠保存)
⚠️ 忘记做支原体检测直接冻存(小心污染全军覆没)
埃泽思生物供应多款细胞冻存液。对于常规工具细胞,以及 MSC、iPSC 等珍贵细胞,均有与之相匹配的相应冻存方案。同时,针对不同的细胞培养工艺,还能提供不同剂型、不同浓度的细胞冻存体系。满足您的需求,必定能成为您产品研发之路上的助力。
埃泽思相关产品推荐
无血清细胞冻存液(治疗级)

完成CDE备案, 符合CDE规定IND申报规则
无需程序降温 , 冻存于-80℃冰箱后置液氮中长期保存
冻存细胞复苏率均高于95%
无血清成分,极大降低批次间差异
无血清,无各类病毒和支原体等污染的可能性
生产过程遵循ISO9001体系, 严格执行cGMP操作标准
无血清细胞冻存液(科研级)

无血清,无各类病毒、霉菌和支原体等污染的可能性
无血清成分,极大降低批次间差异
冻存细胞复苏率高达95%
即用型产品,无需程序降温,冻存于-80℃冰箱后置液氮中长期保存
ES/iPS 细胞冻存液

无动物源成分,降低各类病毒、霉菌和支原体等的污染风险
成分确定,批次间差异小
细胞复苏效率高,该冻存液冻存细胞复苏率高于血清冻存方法
即用型产品,且无需程序降温可直接-80℃冰箱过夜后转移至液氮中长期保存