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【实验室技能】细胞冻存全攻略：让你的细胞“休眠”更安心！
2025-3-6 阅读(177)
亲爱的科研小伙伴们，是否经常为细胞状态不稳定而焦虑？是否担心辛苦培养的细胞因意外污染全军覆没？今天带您解锁科研界的"细胞时光机"——超详细细胞冻存指南，文末更有冻存失败的6大避坑指南！
为什么说冻存是细胞房的头等大事？
✅ 建立珍贵细胞株的"备份保险箱"
✅ 避免连续传代导致的遗传漂变
✅ 应对实验室突发停电的预案
✅ 课题交接时最硬核的"学术遗产"
教科书级冻存操作七步曲
1️⃣ 【黄金时刻】选择对数生长期细胞
（Tips：融合度80-90%时为最佳窗口期）
2️⃣ 预冷冻存液：含10%DMSO的胎牛血清
3️⃣ 细胞消化后悬液离心（1000rpm，5min）
4️⃣ 冻存液轻柔重悬（浓度建议：5×10⁶/mL）
5️⃣ 分装冻存管（切记标注：细胞名称/代数/日期/操作者）
6️⃣ 程序性降温：4℃→-20℃→-80℃梯度冷冻
7️⃣ 最终归宿：液氮罐气相层（-196℃长期保存）
90%新手不知道的冻存黑科技
❗ 冻存管要用内部螺纹款（防液氮渗漏）
❗ 梯度降温神器：异丙醇冷冻盒比传统酒精灯更安全
❗ 复苏后存活率检测：台盼蓝染色+双荧光活死细胞检测
❗ 重要细胞株的"三重备份原则"（不同冻存批次+不同液氮罐）
冻存失败的六大"隐形杀手"
⚠️警报！冻存管从-80℃取出时冒白霜（冰晶形成警报）
⚠️ DMSO未提前预冷导致放热损伤
⚠️ 复苏时水浴温度超过40℃（37℃才是黄金温度）
⚠️ 未使用细胞专用冻存管（普通EP管会爆裂）
⚠️ 液氮罐未定期补充液氮（气相保存≠保存）
⚠️ 忘记做支原体检测直接冻存（小心污染全军覆没）
埃泽思生物供应多款细胞冻存液。对于常规工具细胞，以及 MSC、iPSC 等珍贵细胞，均有与之相匹配的相应冻存方案。同时，针对不同的细胞培养工艺，还能提供不同剂型、不同浓度的细胞冻存体系。满足您的需求，必定能成为您产品研发之路上的助力。
埃泽思相关产品推荐
无血清细胞冻存液（治疗级）
完成CDE备案， 符合CDE规定IND申报规则
无需程序降温 , 冻存于-80℃冰箱后置液氮中长期保存
冻存细胞复苏率均高于95%
无血清成分，极大降低批次间差异
无血清，无各类病毒和支原体等污染的可能性
生产过程遵循ISO9001体系， 严格执行cGMP操作标准
无血清细胞冻存液（科研级）
无血清，无各类病毒、霉菌和支原体等污染的可能性
无血清成分，极大降低批次间差异
冻存细胞复苏率高达95%
即用型产品，无需程序降温，冻存于-80℃冰箱后置液氮中长期保存
ES/iPS 细胞冻存液
无动物源成分，降低各类病毒、霉菌和支原体等的污染风险
成分确定，批次间差异小
细胞复苏效率高，该冻存液冻存细胞复苏率高于血清冻存方法
即用型产品，且无需程序降温可直接-80℃冰箱过夜后转移至液氮中长期保存
