Cy3最大激发光波长为570nm,最大发射光波长为650nm,呈绿色荧光。但是在绿光光谱波长激发下,Cy3也可出现红色荧光。Cy3属于花菁类染料 (Cyanine Dyes),常见的Cy系列染料主要包括有Cy2、Cy3、Cy5等,能与细胞内蛋白质结合。这类染料的荧光特性与传统荧光素类似,但水溶性和对光稳定性 较强,荧光量子产率较高,对pH等环境不敏感。常用于多重染色。Cy3在氩光灯(514nm或528nm)下可以被激发出50%的光强,在氦氖灯 (543nm)或者汞灯(546nm)下则约75%的光强。 Cy3可以和荧光素一起作双标。Cy3还可以和Cy5一起在共聚焦显微镜实验中作多标记。Cy3和Cy5比其他的荧光团探针要更亮,更稳定,背景更弱。因 为激发光和发射光波长很接近TRITC,在荧光显微镜中,可使用和TRITC一样的滤波片。
艾美捷Cy3标记亲和纯化山羊抗小鼠IgG(H+L)二抗:
货号:115-165-003
靶标:小鼠
宿主:山羊
抗体形式:全IgG
特异性:IgG(H+L)
偶联物:Cyanine Cy™3
产品类别:全IgG亲和纯化抗体
克隆性:多克隆
物理状态:冻干固体
储存与复溶:冻干固体应于2-8°C下保存。使用标示体积的去离子水复溶,如有浑浊可离心澄清。使用当天制备工作浓度。产品在2-8°C下作为未稀释液体可稳定保存约6周。
复溶后的长期储存:分装后于-70°C或更低温度下冷冻保存。避免反复冻融。或者,加入等体积的甘油(ACS级或更优),使最终浓度达到50%,并以液体形式在-20°C下保存。
有效期:自复溶之日起一年。如果测试结果符合预期用途,有效期可以延长。
纯度:抗体通过免疫亲和色谱法从抗血清中纯化,使用与琼脂糖珠偶联的抗原进行纯化。
缓冲液:0.01M磷酸钠、0.25M氯化钠,pH 7.6
稳定剂:15 mg/ml牛血清白蛋白(无IgG、无蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠d化钠
建议的工作浓度或稀释范围:大多数应用为1:100 - 1:800
稀释因子以范围形式给出,因为最佳稀释度是多种因素的函数,例如抗原密度、通透性等。实际使用的稀释度必须通过实验确定。
Cyanine Cy™3
最大吸收波长(Amax):550 nm
最大发射波长(Emax):570 nm
Cy3比其他橙红色荧光染料偶联物更亮、更耐光,且背景更低。Cy3偶联物在550 nm处吸收光强,发射峰在570 nm。在荧光显微镜下,Cy3可以使用传统的四甲基罗丹明(TRITC)滤光片组进行观察,因为其激发和发射光谱与TRITC几乎w全相同。我们推荐Cy3作为比TRITC更亮的替代品。Cy3可以用氩激光(514 nm或528 nm线)激发到最大值的约50%,或者用氦氖激光(543 nm线)或汞灯(546 nm线)激发到最大值的约75%。Cy3已用于与荧光素进行双重标记;然而,建议使用窄带通发射滤光片来最小化FITC滤光片组中的Cy3荧光。在共聚焦显微镜下进行多重标记时,Cy3也可以与Alexa Fluor 647配对使用。然而,对于多重标记,更好的选择是罗丹明Red-X,因为它的荧光介于绿色荧光染料(如Alexa Fluor 488)和远红色荧光染料(如Alexa Fluor 647)之间。
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