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小鼠IgG ELISA试剂盒--准确快速定量生物样本中的总IgG

时间:2025/4/7阅读:114
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IgG是一种在免疫系统中发挥关键作用的抗体。IgG抗体由浆细胞产生,是血液和组织中含量丰富的抗体类型。它们参与识别和中和细菌、病毒等病原体,同时还激活免疫系统的其他成分。

 

ICL的小鼠IgG ELISA试剂盒能够准确地快速定量您生物样本中的总IgG

 

艾美捷小鼠IgG ELISA试剂盒#E-90G):

抗体类型:ELISA

宿主:山羊

目标物种:小鼠

特异性/目标:IgG重链+轻链(h+l

规格:1.0

检测范围:9.375 ng/ml 600 ng/ml

灵敏度:2.084 ng/ml

检测时间:100分钟

样本类型:血浆、血清

储存条件:2-8°C

 

所需材料(但未提供)

精密移液管(2 uL100 uL),用于制备和分装稀释液

试管

喷雾瓶或微量滴定板洗涤/抽吸装置

蒸馏水或去离子水

微量滴定板读取器

用于制备试剂和缓冲液溶液的各种玻璃器皿

用于样本收集的离心机

用于血浆收集的抗凝剂

计时器

 

样本采集与处理

所有血液成分和生物材料都应被视为潜在危险品。在处理和丢弃时应遵循普遍预防措施。

如果血液样本凝固、严重溶血、乳糜血或样本完整性受到质疑,请做好记录,并谨慎解读结果。

以下样本采集和储存条件仅供参考。样本稳定性尚未经过评估。

血清样本:通过静脉穿刺采集血液。血凝块形成后,通过离心将血清与细胞分离。立即进行检测,或分装后将样本储存于–80°C(优先)或–20°C。避免反复冻融。

血浆样本:将血液采集到含有抗凝剂的容器中,然后离心。立即进行检测,或分装后将样本储存于–80°C(优先)或–20°C。避免反复冻融。

尿液样本:使用无菌或干净的尿液收集器采集中段尿。离心去除细胞碎片。立即进行检测,或分装后将样本储存于–80°C(优先)或–20°C。避免反复冻融。

已知干扰物:浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。

 

样本稀释

检测要求每个测试样本在使用前必须进行稀释。每次进行检测时,所有样本都应进行双份检测。推荐的稀释倍数仅供参考。稀释倍数应根据未知样本的预期浓度来确定,使稀释后的样本落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样本水平,在运行整个板之前,建议先用一两个代表性样本进行系列稀释。

血清样本:推荐起始稀释倍数为1/50,000。要制备1/50,000稀释液,将5 uL样本转移到995 uL 1X稀释液中。得到1/200稀释液。接下来,将4 uL 1/200稀释液转移到996 uL 1X稀释液中。得到1/50,000稀释液。每个阶段充分混合。

血浆样本:推荐起始稀释倍数为1/50,000。要制备1/50,000稀释液,将5 uL样本转移到995 uL 1X稀释液中。得到1/200稀释液。接下来,将4 uL 1/200稀释液转移到996 uL 1X稀释液中。得到1/50,000稀释液。每个阶段充分混合。

 

检测原理

在此检测中,样本中存在的IgG与吸附在聚苯乙烯微量滴定板孔表面的抗IgG抗体发生反应。经过洗涤去除未结合的蛋白质后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)结合的抗IgG抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的IgG形成复合物。经过另一次洗涤步骤后,通过加入显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)来检测与免疫吸附剂结合的酶。结合的酶量与样本中IgG的浓度成正比;因此,450 nm处的吸光度是测试样本中IgG浓度的衡量指标。可以通过从标准曲线(由标准品构建)中插值得到测试样本中IgG的量,并根据样本稀释情况进行校正。

 

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标准曲线:


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