α-酮戊二酸是由异柠檬酸的氧化脱羧作用产生的,也是谷氨酸脱氨基作用的酮酸产物。它在三羧酸循环(TCA循环)中作为细胞能量代谢的关键中间体发挥作用。此外,它还作为一种氮转运体,促进氨基酸合成,同时抑制肌肉中的蛋白质降解。
Cell Biolabs的α-酮戊二酸(α-KG)检测试剂盒提供了一种简单便捷的方法,用于在96孔板格式中测量α-KG。α-KG通过转氨基作用生成丙酮酸,随后通过比色法或荧光探针进行检测。每个试剂盒提供了足够的试剂,用于100次检测,包括空白、标准品和未知样本。
艾美捷α-酮戊二酸测定试剂盒(比色法)(#MET-5131)通过偶联酶促反应来测量α-KG。α-KG通过转氨基作用生成丙酮酸,随后通过比色探针进行检测。样本和标准品孵育60-180分钟后,使用标准的96孔分光光度计平板读数器(540-570 nm)进行读取。样本与96孔微量滴定板格式中的已知浓度α-KG标准品进行比较。
α-酮戊二酸测定试剂盒(比色法)组分(在蓝色冰袋上运输):
1. α-KG反应转换剂(部件编号51311C):1支750 µL试管
2. α-KG底物混合液(部件编号51322B):1支750 µL试管
3. α-酮戊二酸标准品(部件编号51321C):1支100 µL试管,100 mM溶液
4. α-KG酶混合液(部件编号51312C):1支150 µL试管
5. 比色探针(部件编号51253C):1支150 µL棕色试管
6. 过氧化氢酶(HRP,部件编号234402):1支100 µL试管,100 U/mL甘油溶液
7. 10X检测缓冲液(部件编号50292A):1瓶25 mL
储存:
收到后,将α-KG底物混合液和10X检测缓冲液储存于4°C。其余组分储存于-20°C。
结果示例:
以下图表展示了典型的α-酮戊二酸检测试剂盒结果。以下数据仅供参考,不应用于解释或计算实际样本结果。
图上:α-酮戊二酸标准曲线示例。
图下:肝脏匀浆。将鸡肝在冷1X检测缓冲液中匀浆和超声处理。离心后,根据检测协议对匀浆液进行检测。
α-酮戊二酸测定试剂盒(比色法)引用文献:
Cappello, A. et al. (2022). Extracellular serine empowers epidermal proliferation and psoriasis-like symptoms. Sci Adv. 8(50):eabm7902. doi: 10.1126/sciadv.abm7902 (#MET-5131).
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