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猫、狗内源性对称二甲基精氨酸（SDMA）定量测定试剂盒（酶联免疫法）
阅读：3453 发布时间：2020-8-17对称二甲基精氨酸(SDMA)是一种甲基化的精氨酸。SDMA来自于L -精氨酸残基的核内甲基化，在蛋白水解后释放到细胞质中。SDMA由肾脏排出。
几项研究发现，每3只猫和每10只狗中就有1只可能在它们的一生中患上肾病。
SDMA是肾脏功能的早期生物标志物。它与肾小球滤过率(GFR)有很好的相关性。平均而言，肾功能丧失30 - 40%的慢性肾病(CKD)患者中，SDMA增加。然而，直到75%的肾功能丧失，肌酐才会增加。兽医检测SDMA将比肌酐或胱抑素C测试更早地诊断慢性肾脏疾病(CKD)。
SDMA对肾功能有特异性。不受肝病、心血管疾病、炎症、内分泌疾病等疾病的影响。SDMA另一个令人兴奋的特点是它也不受肌肉质量的影响，这简化了对瘦的老年动物，特别是猫和患有其他导致肌肉萎缩疾病的动物CKD的诊断和监测。
竞争性的SDMA-ELISA试剂盒采用微孔板检测。SDMA与微孔板的固相结合。样品中的SDMA被酰基化，并与固相结合的SDMA竞争固定数量的兔抗SDMA抗血清结合位点。当系统处于平衡状态时，通过洗涤去除游离抗原和游离抗原-抗血清复合物。通过抗兔/过氧化物酶检测与固相SDMA结合的抗体。在450 nm处检测底物TMB /过氧化物酶反应。与固相SDMA结合的抗体量与样品中SDMA浓度成反比。
加样方案
样本准备
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标准品 |
质控品 |
样本 |
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标准品1-6 （μL） |
20 |
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质控品1和2 （μL） |
20 |
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样本 （μL） |
20 |
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酰化缓冲液 （μL） |
20 |
20 |
20 |
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平衡试剂 （μL） |
200 |
200 |
200 |
板子在定轨振荡器上振荡10s
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酰化试剂 （μL） |
5 0 |
5 0 |
5 0 |
在
定轨振荡器
上
室温
孵育
20
分钟
每样20μL用于ELISA试验。
ELISA加样方案
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标准品 |
质控品 |
样本 |
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标准品1-6 （μL） |
20 |
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质控品1和2 （μL） |
20 |
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样本 （μL） |
20 |
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抗血清 （μL） |
5 0 |
5 0 |
5 0 |
盖上板膜 在定轨振荡器上室温孵育 9 0分钟
洗板4次 ，每次用300 μL 洗液
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酶 结合物（ μL ） |
100 |
100 |
100 |
在定轨振荡器上室温孵育 30 分钟
洗板4次 ，每次用300 μL 洗液
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底物液（ μL ） |
100 |
100 |
100 |
在定轨振荡器上室温孵育 2 5±5分钟
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终止液（ μL ） |
100 |
100 |
100 |
读取450nm波长吸光度