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精品啪啪一级免费视频 如何解决干细胞存活率低的问题?

时间:2017/10/10阅读:2388
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在解冻冻存干细胞时,发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题, 是什么原因导致,该怎么进行解决?现在我们大家一起往下看吧。或许能给您的实验问题的解决找到答案!
低存活率
出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下:
1.解冻过程中细胞裂解
推荐的解决方案:可预期到一定量的细胞死亡,因此细胞的浓度应足够高,考虑到这一损失。起始浓度为106至107细胞/毫升。
2.解冻过程中的问题
推荐的解决方案:在-70℃至-80℃下保存冷冻的培养物,保存时间为1-5天,但这不是保存的方法。在37℃充分解冻后应立即开始培养。
3.对冷冻液过敏
推荐的解决方案:A.*或部分更换培养基,减少培养基中冷冻液的量。在24小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。
B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物,取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的*条件在对数期。
4.被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄
推荐的解决方案:解冻zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长,存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
大量细胞碎片
出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下:
1.冷冻时细胞密度过低
推荐的解决方案:缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后,立即将冻存管浸入在37℃的水浴中,并震荡至全部融化,然后迅速地转移到预热的培养基中。
2.不适当的冷冻过程
推荐的解决方案:解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术,并确保使用了适量和适合的冷冻液。
生长缓慢
出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下:
1.培养瓶的大小
推荐的解决方案:一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中,使干细胞密度上升;如,根据培养基的体积,从75cm2的烧瓶转移到2或3个25cm2的烧瓶中。
2.细胞密度过低
推荐的解决方案:提高未来冷冻物种细胞的冻存密度,或使用较小的培养容器,或解冻多个试管来进行培养。
BR    Casein Hydrolysate    250克    酶水解酪蛋白
        1公斤    
BR,90%    Soy protein isolate    250克    豆蛋白质
BR    Lactalbumin hydrolysate    250克    水解乳蛋白
        1公斤    
诊断试剂用    Calf serum    200毫升    小牛血清
BR    Fetal bovine serum(Characterized FBS)    200毫升    标准胎牛血清
BR    Fetal bovine serum(Characterized FBS)    100毫升    优级胎牛血清
        500毫升    
BR    Fetal bovine serum(Defined FBS)     100毫升    特级胎牛血清
干细胞

 

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