Calu-3细胞，Calu-3细胞株的复苏方法

产品名称：Calu-3细胞

中文名称：腺癌细胞

货号：Calu-3

规格：1~3*106细胞/25cm2培养瓶

上海蒂科生物 细胞株、血清、培养基、 各种细胞培养相关试剂，开学酬宾*中，更多产品，更大优惠，敬请！！

1.预热培养用液把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。

2.用75酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。

3.正确摆放使用的器械保证足够的操作空间不仅便于操作而且可减少污染。

4.点燃酒精灯注意火焰不能太小。

5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶放入微波炉内高火8分钟再次消毒。

6.取出预热好的培养用液取出已经预热好的培养用液用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。

7.从培养箱内取出细胞注意取出细胞时要旋紧瓶盖用酒精棉球擦拭显微镜的台面再在镜下观察细胞。

8.打开瓶口将各瓶口一一打开同时要在酒精灯上烧口消毒。

二.胰蛋白酶消化

1.加入消化液小心吸出旧培养液用PBS清洗冲洗加入适量消化液胰蛋白酶液注意消化液

的量以盖住细胞*消化温度是37℃。

2. 显微镜下观察细胞倒置显微镜下观察消化细胞若胞质回缩细胞之间不再连接成片表明此时细胞

消化适度。

3.吸弃消化液加入培养液弃去胰蛋白酶液注意更换吸管加入新鲜的培养液。

三.吹打分散细胞

1.吹打制悬用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。

2.吸细胞悬液入离心管将细胞悬液吸入10ml离心管中。1.预热培养用液把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。

2.用75酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。

3.正确摆放使用的器械保证足够的操作空间不仅便于操作而且可减少污染。

4.点燃酒精灯注意火焰不能太小。

5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶放入微波炉内高火8分钟再次消毒。

6.取出预热好的培养用液取出已经预热好的培养用液用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。

7.从培养箱内取出细胞注意取出细胞时要旋紧瓶盖用酒精棉球擦拭显微镜的台面再在镜下观察细胞。

8.打开瓶口将各瓶口一一打开同时要在酒精灯上烧口消毒。

二.胰蛋白酶消化

1.加入消化液小心吸出旧培养液用PBS清洗冲洗加入适量消化液胰蛋白酶液注意消化液

的量以盖住细胞*消化温度是37℃。

2. 显微镜下观察细胞倒置显微镜下观察消化细胞若胞质回缩细胞之间不再连接成片表明此时细胞

消化适度。

3.吸弃消化液加入培养液弃去胰蛋白酶液注意更换吸管加入新鲜的培养液。

三.吹打分散细胞

1.吹打制悬用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。

2.吸细胞悬液入离心管将细胞悬液吸入10ml离心管中。1.预热培养用液把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。

2.用75酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。

3.正确摆放使用的器械保证足够的操作空间不仅便于操作而且可减少污染。

4.点燃酒精灯注意火焰不能太小。

5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶放入微波炉内高火8分钟再次消毒。

6.取出预热好的培养用液取出已经预热好的培养用液用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。

7.从培养箱内取出细胞注意取出细胞时要旋紧瓶盖用酒精棉球擦拭显微镜的台面再在镜下观察细胞。

8.打开瓶口将各瓶口一一打开同时要在酒精灯上烧口消毒。

二.胰蛋白酶消化

1.加入消化液小心吸出旧培养液用PBS清洗冲洗加入适量消化液胰蛋白酶液注意消化液

的量以盖住细胞*消化温度是37℃。

2. 显微镜下观察细胞倒置显微镜下观察消化细胞若胞质回缩细胞之间不再连接成片表明此时细胞

消化适度。

3.吸弃消化液加入培养液弃去胰蛋白酶液注意更换吸管加入新鲜的培养液。

三.吹打分散细胞

1.吹打制悬用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。

2.吸细胞悬液入离心管将细胞悬液吸入10ml离心管中。

3.平衡离心平衡后将离心管放入台式离心机中以1000转/分钟离心6-8分钟。

4.弃上清液加入新培养液弃去上清液加入2ml培养液用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。