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精品啪啪一级免费视频 亲水作用色谱柱操作建议

时间:2025/4/11阅读:672
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精品啪啪一级免费视频 亲水作用色谱柱操作建议(CORTECS HILICBEH HILICBEH Amide)

 

ACQUITY UPLC BEH 150MM.jpg


亲水作用色谱柱的使用方法与反相色谱柱有很大的不同,需要加以注意。

 

1) 样品制备

应尽可能使用较高比例的有机溶剂(95%乙腈),以避免溶剂效应。如果存在样品溶解问题,应至少使用50/50乙腈/水,并减少进样体积。

 

2) 柱平衡

初次使用时,先用50倍柱体积的50/50乙腈/(CORTECS HILICBEH HILIC,如果流动相条件含有缓冲盐则需添加10 mM流动相缓冲盐)60/40乙腈/(BEH Amide)对柱进行老化;

开始进样前,用20倍柱体积的起始流动相条件进行平衡;

如果使用梯度条件,每次梯度之间,用8-10倍柱体积的起始流动相条件再次平衡。

没有充分老化平衡的色谱柱,将会出现柱效较低、以及保留时间漂移的问题。

 

3) 柱清洗再生

对于ACQUITY UPLC BEH HILICCORTECS HILIC色谱柱,用50/50乙腈/水清洗以去除极性污染物。如果不能解决问题,用5/95的乙腈/水冲洗;

对于ACQUITY UPLC Amide色谱柱,可采用10分钟的梯度洗脱从100%有机相到100%水相。值得注意的是当水相比例升高,压力将迅速增加,当水相比例超过60%时需降低流速。如果有必要可重复清洗。

 

4) 柱保存

先将缓冲盐从色谱柱内冲洗干净,然后将色谱柱保存在95/5乙腈/(BEH HILICCORTECS HILIC)100%乙腈(BEH Amide)中。


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