精品啪啪一级免费视频 InertSustainSwift C18色谱柱操作说明

1.色谱柱信息

  InertSustainSwift C18液相色谱柱是在新型高纯度球状硅胶基质上键合十八烷基的反相分离模式色谱柱，适合用于弱极性至中等极性例如合成药物、中药、多肽、有机酸等的分离。InertSustainSwift C18液相色谱柱从硅胶基质的合成，到化学处理和装填后的性能检测，都是在本公司严格的产品控制下进行，因此不同批次的柱与柱之间具有优异的重现性；通过独有的装填技术填装的色谱柱柱床密度均一稳定，从而确保色具有高柱效，硅胶粒径分布均匀，确保柱压极低。InertSustainSwift C18液相色谱柱采用改性硅胶基体，惰性化程度很高，端基封尾彻底，即使是酸性和碱性或者金属配位性化合物化合物分析，也能保持良好的峰型，可以用于方法开发中反相ODS柱的首选色谱柱。

为了能长期保持InertSustainSwift C18液相色谱柱的优越性能和正确的使用色谱柱，在使用色谱柱之前请仔细阅读本说明书。

2.使用前的检查与须知事项

●检查包装箱的外观有无异常。

●打开包装，检查色谱柱的填料名称、尺寸规格、连接型式是否相符。

●色谱柱中封存流动相为乙腈/水或者甲醇/水的混合物，具体比例请参考柱效报告。

3.色谱柱填料规格

4.色谱柱安装与操作

  色谱柱在运输过程中，两端用堵头密封。当将色谱柱接入色谱仪器系统时，首先请确保系统中的溶剂和液相柱中封存溶剂是互溶的。如果不能互溶，请采用一种能够与系统及色谱柱都能互溶的溶剂对系统进行充分过渡之后再将色谱柱连接到系统中，并注意流动相的方向要与柱上标记的方向保持一致。我公司提供的常规液相色谱柱标准接头型式为1/16英寸Waters接头螺丝型(如下左图)，同时还有耐高压液相系统的UP型(如下右图)，如果需要其他接头型式请另行咨询。

  色谱柱连接好之后，请确认无漏液现象之后再进行后续操作。

  新的InertSustain C18柱是保存在乙腈/水或者甲醇/水的混合溶液中，在储存和运输过程中，硅胶填料可能会干涸，推荐用纯的甲醇或乙腈冲洗10~20倍柱体积对色谱柱进行活化，流速从0.1mL/min缓慢上升到最佳流速。(如果在活化过程中即发现压力和基线不正常时，请及时联系我公司工程师及时处理。)然后再用不含缓冲盐的流动相进行平衡20倍柱体积，

再用流动相平衡，待压力和基线稳定之后，再进样分析。

5.样品与流动相

  为避免色谱柱堵塞，所有样品及溶剂，包括缓冲溶液在内，在使用前必须用0.45μm或者0.22μm的滤膜过滤。InertSustainSwift C18色谱柱耐纯水能力强，可以使用纯水或者纯的缓冲盐水溶液作为流动相。

6.色谱柱的保养

●pH InertSustainSwift C18色谱柱可在pH1~10范围内使用，为保持色谱柱良好的寿命，请避免较强的酸或碱性样品或者流动相进入色谱柱。

●耐压 常规色谱柱耐受压力为20MPa，HP系列耐压为50MPa，UHPLC系列耐受80MPa，但是正常的压力建议控制在耐受压力的2/3以下。长时间在高压下运行会对色谱柱造成难以修复的损害，因此系统压力升高之后，建议尽快排查系统，如果是色谱柱压力升高，请及时采用适当溶剂冲洗色谱柱。

●温度 最高操作温度为60℃，长时间在高温下操作会显著降低色谱柱寿命。

●冲洗 新柱是保存在高比例的有机溶剂中，如果是采用缓冲盐流动相的情况下，做样之前请务必用比缓冲盐稍高比例的水充分过渡，然后再用流动相平衡。每天做样完毕之后，应充分冲洗色谱柱，首先用稍高比例的水相冲洗，例如乙腈/水=10：90(v/v)冲洗20倍柱体积，然后用乙腈或者高比例的乙腈/水混合溶液冲洗20倍柱体积，最后保存在此流动相下，其中冲洗用的水相也可以添加一定比例的酸，例如0.1%的甲酸、乙酸或者磷酸等等，可能会有更好的清洗效果。如果是做蛋白质、多肽类易吸附的样品，为了不让细孔内部变性，建议采取含三氟乙酸的流动相梯度冲洗，反复冲洗三次以上。

●反冲 如果色谱柱用久了之后，有明显的杂质吸附或者柱压明显升高，建议可以采取反冲方法冲洗色谱柱。具体方法如下：柱子反接，不接检测器，乙腈/水=10：90(v/v)，冲洗50倍柱体积，之后100%乙腈冲洗50倍柱体积。流速采用平时分析流速的1/3，然后正接，乙腈/水=10：90(v/v)，冲洗10倍柱体积，然后用流动相平衡做样。

●储存 色谱柱长期不用，建议日常冲洗方法完成之后，再用纯乙腈或者甲醇冲洗20倍柱体积，然后保存在该流动相条件下，之后卸掉色谱柱，两端用堵头密封，并放在温度变化小的场所。