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基于蒸发光检测器ELSD的凤仙萜四醇皂苷的含量检测
阅读:661 发布时间:2019-6-12- 急性子(测试物质:凤仙萜四醇皂苷)
急性子 Jixingzi IMPATIENTIS SEMEN
本品为凤仙花科植物凤仙花心 Impatiens balsamina L• 的干燥成熟种子。夏、秋季果实即将成熟时采收,晒干,除去果皮和杂质。
【性状】本品呈椭圆形、扁圆形或卵圆形,长 2 〜 3 mm , 宽 1.5 〜 2.5 mm 。 表面棕褐色或灰褐色,粗糙,有稀疏的白色 或浅黄棕色小点,种脐位于狭端,稍突出。质坚实,种皮薄,子叶灰白色,半透明,油质。气微,味淡、微苦。
【鉴别】 ( 1) 本品粉末黄棕色或灰褐色。种皮表皮细胞 表面观形状不规则,垂周壁波状弯曲。腺鱗头部类球形, 4 〜 5 ( 〜 12) 细胞,直径 22 〜 60 急性子 μ m , 细胞内充满黄棕色物。草酸钙 针晶束存在于黏液细胞中,长 16 〜 6 μ m 。 内胚乳细胞多角形,擘稍厚,内含脂肪油滴,常与种皮颓废组织相连。
(2) 取本品粉末 4 g , 加丙酮 40 m l , 加 热回流 1 小时,弃去丙酮液,药渣挥干,加水饱和正丁醇 40 ml , 超声处理 30 分钟,滤过,滤液回收溶剂至干,残渣加甲醇 lml 使溶解,作供试品溶液。另取急性子对照药材 4 g , 同法制成对照药材溶液。再取凤仙萜四醇皂苷 K 对照品、凤仙萜四醇皂苷 A 对照品,加甲醇制成每 lml 各含 lmg 的混合溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则 0502) 试验,吸取上述三种溶液 各 2 μ 1 ,分别点于同一硅胶 G 薄层板上,以三氯甲烷 - 甲醇 - 水 - 甲酸 ( 7 : 3 : 0.5 : 0.5) 为展开剂,展开,取出,晾干,喷以 5% 香草醛硫酸溶液,在 l 05° C 加热至斑点显色清晰,在日光下检 视。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
【检查】杂质 不得过 5% 。
水分 不得过 11.0% 。
总灰分 不得过 6.0% 。
【浸出物】照醇溶性浸出物测定法(通则 2201) 项下的热浸法测定,用乙醇作溶剂,不得少于 10. 0% 。
【含 量 测定】照液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相 A , 以水为流动相 B ,按 下表中的规定进行梯度洗脱; 蒸发光散射检测器检测( 漂移管温度:65 度,气体流速3l/min ,气体压力:3.8bar) 。 理论板数按凤仙萜四醇皂苷 K 峰计算应不低于 3000 。
时间(分钟) 流动相 A(%) |
流动相 B(%) |
|
0 〜 15 |
24->28 |
76->72 |
15 〜 25 |
28 |
72 |
25 〜 30 |
28->40 |
72->60 |
对照品溶液的制备 取凤仙萜四醇皂苷 K 对照品、凤仙 萜四醇皂苷 A 对照品适量,精密称定,加甲醇分别制成每 lml 各含凤仙萜四醇皂苷 K 0. 5 mg 、 凤仙萜四醇皂苷 A 0.25 mg 的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约 lg , 精密称定,置索氏提取器中,加石油醚 ( 60 〜 90° C ) 适量,加热回流 2 小时,弃去石油醚液,药渣挥去溶剂,转移至具塞锥形瓶中,精密加 入 80% 甲醇 50 ml , 称定重量,加热回流 1 小时,放冷, 再称定重量,用 80% 甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密 量取续滤液 20 ml , 回收溶剂至干,残渣加甲醇适量使溶解并转移至 2 ml 量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液, 即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液 5 μ l 、 15 μ l , 供试品溶 液 10 μl , 注入液相色谱仪,测定,用外标两点法对数方程计算, 即得。
本品按干燥品计算,含凤仙萜四醇皂苷 K(C54H92O25) 和 凤仙萜四醇皂苷 A ( C 48 H 82 020 ) 的总量不得少于 0. 20% 。
【性味与归经】微苦、辛,温;有小毒。归肺、肝经。
【功能与主治】破血,软坚,消积。用于癥瘕痞块,经闭,噎膈。
【用法与用 量 】 3 〜 5 g 。
【注意】孕妇慎用。
【贮藏】置干燥处。