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基于蒸发光检测器ELSD的知母皂苷BII的含量检测
阅读:1734 发布时间:2019-6-10- 知母(测试物质:知母皂苷BII)
知母 Zhimu ANEMARRHENAE RHIZOMA
本品为百合科植物知母 A nemarrhena asphodeloides . Bge. 的干燥根茎。春、秋二季采挖,除去须根和泥沙,晒干,习称 “ 毛知母 ”; 或除去外皮,晒干。
【性状】本品呈长条状,微弯曲,略扁,偶有分枝,长 3 〜 15 cm , 直径 0. 8 〜 1. 5 cm , 一端有浅黄色的茎叶残痕。表面黄棕色至棕色,上面有一凹沟,具紧密排列的环状节,节上密生黄棕色的残存叶基,由两侧向根茎上方生长;下面隆起而略皱缩,并有凹陷或突起的点状根痕。质硬,易折断,断面黄白色。 气微,味微甜、略苦,嚼之带黏性。
【鉴别】 ( 1) 本品粉末黄白色。黏液细胞类圆形、椭圆形或梭形,直径 53 〜 247 pm , 胞腔内含草酸钙针晶束。草酸钙针 晶成束或散在,长 26 〜 110 pm 。
取本品粉末 0. 5 g , 加稀乙醇 10 ml , 超声处理 20 分钟, 取上清液作为供试品溶液。另取芒果苷对照品,加稀乙醇制 成每 lml 含 0.5 mg 的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法 ( 通则 0502) 试验,吸取上述两种溶液各知 4 μl ,分别点于同一聚酰胺薄膜上,以乙醇 - 水 ( 1 : 1) 为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯 ( 365 n m ) 下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
取本品粉末 0. 2 g , 加 30% 丙酮 10 ml , 超声处理 20 分钟,取上清液作为供试品溶液。另取知母皂苷 B II 对照品,加 30% 丙酮制成每 lml 含 lmg 的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则 0502) 试验,吸取上述两种溶液各 4 μl ,分别点于同一硅胶 G 薄层板上,以正丁醇 - 冰醋酸 - 水 ( 4 : 1 : 5) 的上 层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以香草醛硫酸试液,在 l 05° C 加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
【检查】水分 不得过 12. 0% 。
总灰分 不得过 9.0% 。
酸不溶性灰分 不得过 4.0% 。
【含量测定】芒果苷 照液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈 -0.2% 冰醋酸水溶液 ( 15 : 85) 为流动相;检测波长为 258 nm 。 理论板数按芒果苷峰计算应不低于 6000 。
对照品溶液的制备 取芒果苷对照品适量,精密称定,加稀乙醇制成每 lml 含 50 μg 的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约 0.1 g , 精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇 25 ml , 称定重量,超声处理(功率 400 W , 频率 40 kHz )30 分钟,放冷,再称定重量,用稀乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 1 μl ,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品按干燥品计算,含芒果苷 ( C 19 H 18 O 11 ) 不得少于 0. 70% 。
知母皂苷 BI I 照液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验 以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈 - 水 ( 25 : 75) 为流动相; 蒸发光散射检测器检测( 漂移管温度:65 度,气体流速3l/min ,气体压力:3.8bar) 。理论板数按知母皂苷 BII 峰计算应不低于 1 0000 。
对照品溶液的制备 取知母皂苷 BII 对照品适量,精密称定,加 30% 丙酮制成每 lml 含 0.50 mg 的溶液,即得。
供试品溶液的制备取 本品粉末(过三号筛)约 0. 15 g , 精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加 入 30% 丙酮 25 ml , 称定重量,超声处理(功率 400 W , 频率 40 kHz ) 30 分钟,取出,放冷, 再称定重量,用 30% 丙酮补足减失的重量,摇匀。滤过,取续 滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液 5 μl 、 1 0 μl ,供试品溶 液 5 〜 l 0 μl , 注入液相色谱仪,测定,用外标两点法对数方程计算,即得。
本品按干燥品计算,含知母皂苷 Bn (C45H76 019 ) 不得少于 3. 0% 。
饮片
【炮制】知母 除去杂质,洗净,润透,切厚片,干燥, 去毛屑。
本品呈不规则类圆形的厚片。外表皮黄棕色或棕色,可见少量残存的黄棕色叶基纤维和凹陷或突起的点状根痕。切面黄白色至黄色。气微,味微甜、略苦,嚼之带黏性。
【检查】酸不溶性灰分同药材,不得过 2. 0% 。
【含量测定】同药材,含芒果苷( C19H18O 11 ) 不得少于 0.50% ,含知母皂苷 B II (C45H76 〇 19 ) 不得少于 3. 0 % 。
【鉴别】【检查】 ( 水分 总灰分 ) 同药材。
盐知母 取知母片,照盐水炙法炒干。
本品形如知母片,色黄或微带焦斑。味微咸。
【检查】酸不溶性灰分 同药材,不得过 2. 0% 。
【含量测定】同药材,含芒果苷( C19H18O 11 ) 不得少于 0.40% ,含知母皂苷 B II (C45H76019 ) 不得少于 2. 0% 。
【鉴别】【检查】 ( 水分 总灰分 ) 同药材。
【性味与归经】苦、甘,寒。归肺、胃、肾经。
【功能与主治】清热泻火,滋阴润燥。用于外感热病,高 热烦渴,肺热燥咳,骨蒸潮热,内热消渴,肠燥便秘。
【用法与用量】 6 〜 12g 。
【贮藏】置通风干燥处,防潮。